Mediu nutritiv

Versiunea actuală a paginii nu a fost încă examinată de colaboratori experimentați și poate diferi semnificativ de versiunea revizuită pe 27 decembrie 2021; verificările necesită 6 modificări .

Un mediu nutritiv  este un substrat monocomponent sau multicomponent utilizat pentru cultivarea microorganismelor sau a culturilor celulare ale organismelor superioare.

Cerințe pentru mediile nutritive

• sa fie hranitor , adica sa contina intr-o forma usor digerabila toate substantele necesare satisfacerii nevoilor nutritionale si energetice. La cultivarea unui număr de microorganisme, în medii sunt introduși factori de creștere  - vitamine, unii aminoacizi pe care celula nu îi poate sintetiza.
• au o concentrație optimă de ioni de hidrogen - pH , deoarece numai cu o reacție optimă a mediului care afectează permeabilitatea învelișului, microorganismele pot absorbi nutrienții.

Pentru majoritatea bacteriilor patogene , un mediu slab alcalin (pH 7,2-7,4) este optim. Excepția este vibrio cholerae  - optimul său este în zona alcalină (pH 8,5-9,0) și agentul cauzator al tuberculozei , care necesită o reacție ușor acidă (pH 6,2-6,8). Pentru ca, în timpul creșterii microorganismelor, produsele acide sau alcaline ale activității lor vitale să nu modifice pH-ul, mediile trebuie să aibă un tampon , adică să conțină substanțe care neutralizează produsele metabolice.

• să fie izotonic pentru celula microbiană; adică presiunea osmotică din mediu trebuie să fie aceeași cu cea din interiorul celulei. Pentru majoritatea microorganismelor, mediul optim este soluția de clorură de sodiu 0,5% .
• fi steril , deoarece microbii străini împiedică creșterea microbului studiat, determinarea proprietăților acestuia și modifică proprietățile mediului.
• mediile dense trebuie să fie umede și să aibă o consistență optimă pentru microorganisme.
• au un anumit potențial redox , adică raportul dintre substanțele care donează și acceptă electroni, exprimat prin indicele RH 2 . De exemplu, anaerobii se reproduc la RH 2 nu mai mare de 5, iar aerobii  la RH 2 nu mai mici de 10.
• să fie cât mai unificat posibil , adică să conțină un număr constant de ingrediente individuale.

Este de dorit ca mediul să fie transparent  - este mai convenabil să monitorizați creșterea culturilor, este mai ușor să observați contaminarea mediului cu microorganisme străine.

Clasificare

• Pentru ingredientele originale:
  • medii naturale - preparate din produse de origine animală și vegetală (carne, ascită, făină de oase, drojdie furajeră, cheaguri de sânge etc.)
  • medii sintetice - preparate din anumiți compuși organici și anorganici puri din punct de vedere chimic, luați în concentrații exact specificate și dizolvați în apă dublu distilată .
• În funcție de gradul de pregătire:
  • medii nutritive gata preparate (în vase Petri, în flacoane)
  • amestecuri uscate
• După consistență (grad de densitate):
  • lichid (bulion)
  • semi-lichid
  • dens

Mediile dense și semi-lichide diferă de cele lichide prin prezența unui agent de gelifiere ( agar-agar , mai rar gelatină). În plus, proteinele coagulate din ou sau zer, cartofi și medii de silicagel sunt folosite ca medii solide. Unele microorganisme folosesc gelatina ca nutrient - pe măsură ce cresc, mediul se lichefiază.

• In compozitie:
  • simplu: bulion de peptonă de carne (MPB), agar peptonă de carne (MPA), gelatină nutritivă,
  • complex - medii multicomponente care pot contine aminoacizi, vitamine, oligoelemente si alte substante.
• Cu programare:
  • principalele sunt folosite pentru cultivarea majorității microorganismelor, de exemplu, MPB, MPA, bulion , agar ciocolată , apă peptonă.
  • speciale - sunt folosite pentru izolarea și creșterea microorganismelor care nu cresc pe medii simple.
  • elective (selective) - servesc la izolarea unui anumit tip de microbi, a căror creștere favorizează, întârzie sau suprimă creșterea microorganismelor înrudite. Mediile devin elective atunci când li se adaugă anumite antibiotice, săruri și modificări ale pH-ului. Mediile elective lichide sunt numite medii de acumulare .
  • diagnostic diferențial - vă permite să distingeți un tip de microbi de altul prin activitatea enzimatică.
  • transport - conceput pentru însămânțarea primară și transportul materialului de testat.

Pregătirea mass-media

Ustensile pentru medii de gătit

Vasele pentru prepararea mediului nu trebuie să conțină substanțe străine, cum ar fi alcaline eliberate de anumite tipuri de sticlă, sau oxizi de fier, care pot pătrunde în mediu atunci când este fiert în oale ruginite. Este mai bine să folosiți vase din sticlă, email sau aluminiu. Înainte de utilizare, vasele trebuie spălate bine, clătite și uscate. Sticlăria nouă se fierbe în prealabil timp de 30 de minute într-o soluție de acid clorhidric 1-2% , după care se clătește cu apă curentă timp de o oră.

Materii prime

Materiile prime inițiale pentru prepararea majorității mediilor sunt produse de origine animală și vegetală, precum și semifabricate gata făcute.

Etape de gătit

1. prepararea berii : mediile sunt fierte la foc deschis, la bain-marie , la autoclavă sau la digestoare.
2. Setarea pH-ului : se face aproximativ folosind hârtie indicatoare , pentru o determinare precisă utilizați un potențiometru sau un comparator. În timpul sterilizării, pH-ul scade cu 0,2, așa că se prepară mai întâi o soluție mai alcalină.
3. clarificarea se efectuează dacă mediul devine tulbure sau întunecat în timpul gătirii. Pentru aceasta, se utilizează proteine ​​din ou sau ser de sânge.
4. filtrarea mediilor gelatinoase lichide și topite se realizează prin filtre de hârtie umedă sau pânză. Filtrarea mediului de agar este dificilă - se solidifică rapid. De obicei, acestea sunt filtrate printr-un filtru din tifon de bumbac.
5. se toarnă mediul în cel mult ¾ din recipient, deoarece în timpul sterilizării dopurile se pot umezi și mediul își va pierde sterilitatea.
6. sterilizare : modul de sterilizare depinde de compoziția mediului și este indicat în rețeta acestuia.
7. Control

• pentru a controla sterilitatea mediului, acestea sunt introduse într-un termostat timp de 2 zile , după care sunt vizualizate.
• controlul chimic stabilește în final pH-ul, conținutul de azot total și amino, peptonă, cloruri.
• pentru control biologic , mai multe probe din mediu sunt inoculate cu culturi special selectate, iar creșterea acestora este folosită pentru a judeca proprietățile nutriționale ale mediului.

Tipuri de medii nutritive

• AGV tip mediu (TU 9229-083-00419785-97).
• Mediu agar drojdie-lapte-sare (ADMS)
• Mediu Baird-Parker (agar)
• Mediu Blaurock (agar)
• Mediu Bushnell-Haas (agar)
• Mediu Wilson-Blair (agar)
• Hamburg mediu (agar)
• Gause-1 mediu (agarizat)
• Mediu Carey-Blair (agar) sau mediu Carey-Blair (Carey-Blair).
• Kitt Tarozzi mediu (agar)
• Mediu Lowenstein-Jensen.
• Miercuri Levin-GRM
• Mediul Leonian (agar, folosit în micologie)
• Mediul McConkey (agar)
• Mediu Murashige-Skoog (agar)
• Muller-Hinton mediu (dens)
• MPC-2 mediu (agar)
• Tip mediu MRS (agar) (GOST 51331-99) - abrevierea latină a mediului anterior
• Neogen de tip mediu
• Mediu de coadă (agar)
• Mediul Sabouraud (agar, dextroză , folosit în micologie, SDA)
• Miercuri Smirnova A. M.
• Mediul Soton (agar)
• SR-15 mediu (agar)
• Mediu de stradă (agar)
• Mediul lui Stuart (transport)
• Mediu Tryptone Soy Agar (TSA).
• Mediu Hayflick (agar) sau mediu lichid Hayflick
• Mediu Chapek (agar)
• Schenck-Hildebrandt mediu
• Amies Medium (transport) sau Amies Liquid Medium
• Mediu Endo (agar)
• Mediu Ashby (agar) [1] [2]
• Mediu LB

Imagini

• Eprubete cu medii nutritive lichide (stânga 6) pentru identificarea microorganismelor prin capacitatea lor de a schimba mediul

• Eprubete cu mediu nutritiv dens înclinat (agar cu trei zaharuri) inoculat cu diferite microorganisme

• O colonie de ciuperci microsporia pe un mediu dens de creștere înclinat

• Cultură pură de Escherichia coli pe un mediu nutritiv dens electiv (mediu Endo) pe o placă Petri

• Cultură pură de antrax pe un mediu nutritiv dens electiv ( agar cu sânge ) pe o placă Petri

• Vase Petri cu medii de cultură solide

Vezi și

• Cultura celulară și tisulară
• Biotehnologie
• agar-ciocolată
• agar agar

Note

1. ↑ Smirnov A. M. Creșterea și metabolismul rădăcinilor izolate într-o cultură sterilă. M.: Nauka, 1970. 455 p.
2. ↑ Butenko R.G. Cultura țesuturilor izolate și fiziologia morfogenezei plantelor. M.: Nauka, 1964. 272 ​​​​p.

Literatură

• Zamchuk L. A. Culture media Arhivat 18 ianuarie 2021 la Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , a 3-a ed. — M.: Enciclopedia sovietică. - Or. 19.
• Kalina G.P. Medii nutritive sintetice Arhivat 11 august 2017 la Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , ed. a 3-a. — M.: Enciclopedia sovietică. - T. 23.
• Birger M. O. Diferențial diagnostic media Copie de arhivă din 29 august 2017 la Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , ed. a 3-a. — M.: Enciclopedia sovietică. - T. 7.
• Belokrysenko S. S. Bacterial culture Arhivat 9 decembrie 2020 la Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , a 3-a ed. — M.: Enciclopedia sovietică. - T. 2.
• Belokrysenko S. S. Hemoculture Arhivă copie din 12 iulie 2017 la Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , ed. a 3-a. — M.: Enciclopedia sovietică. - T. 5.
• Belokrysenko S. S. Test biologic în microbiologie Copie de arhivă din 11 iulie 2017 la Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , ed. a 3-a. — M.: Enciclopedia sovietică. - T. 3.
• Ignatova T. N., Pospelova T. V., Gubin V. A., Dobrynin Ya. V., Chertkov I. L. Culturi de celule și țesuturi (medii nutritive pentru culturi de celule și țesuturi) Copie de arhivă din 26 octombrie 2020 pe Wayback Machine // Great Medical Encyclopedia , ed. a 3-a. — M.: Enciclopedia sovietică. - T. 12.
• [bse.sci-lib.com/article110808.html Titrul bacteriilor] // Marea enciclopedie sovietică  : [în 30 de volume]  / cap. ed. A. M. Prohorov . - Ed. a 3-a. - M .  : Enciclopedia Sovietică, 1969-1978.