Semănatul ( bakposev ) este una dintre metodele staționare de cultivare a microorganismelor pe medii nutritive, utilizată pentru diagnosticarea culturală în microbiologia medicală, precum și pentru studiul proprietăților biochimice și biologice în diferite scopuri biotehnologice. În funcție de conținutul bacteriilor studiate din probă, inocularea se efectuează pe medii nutritive dense (pentru obținerea de colonii izolate și determinarea purității culturii). Dacă conținutul de microorganisme din materialul de testat este nesemnificativ, atunci inocularea se efectuează pe medii lichide de îmbogățire. Există diferite metode de însămânțare [1] .
Metodele speciale sunt caracterizate prin adăugarea unei anumite componente sau schimbarea bazei.
Metodele elective se caracterizează prin obținerea creșterii numai a microorganismului de interes.
Permite identificarea tipurilor individuale, a speciilor și a grupurilor de bacterii.
Pentru culturi [2] , se folosesc bucle microbiologice , mai rar ace și spatule. Cel mai adesea, pentru cultivare se folosesc o eprubetă și o cutie Petri . Ansa bacteriană este un instrument universal pentru însămânțarea culturii . În plus, se folosește un ac bacterian special pentru însămânțare cu o injecție, iar spatule de metal sau sticlă sunt folosite pentru însămânțarea pe vase Petri . Pentru inocularea materialelor lichide, împreună cu ansa, se folosesc pipete gradate și Pasteur .
La semănat, iau o eprubetă în mâna stângă, iar cu dreapta, strângând strâns dopul cu degetul al patrulea și al cincilea, îl scot. Ținând bucla cu celelalte degete ale aceleiași mâini, mai întâi în poziție orizontală , apoi în poziție verticală , este adusă la flacără deschisă și arsă la o căldură roșie . Inoculul este colectat cu o buclă răcită, după care eprubeta este închisă cu un dop, ținând în prealabil marginea eprubetei peste flacăra unei lămpi cu alcool . Pluta nu trebuie arsă. Apoi, o ansă cu inocul este introdusă în eprubeta cu agar înclinat, coborând-o până la condensatul din partea inferioară a mediului, iar materialul este distribuit în mișcare în zig-zag pe suprafața înclinată a agarului. După îndepărtarea buclei, ardeți marginea eprubetei și închideți-o cu un dop. Bucla este flambată în flacăra unui arzător și plasată într-un trepied cu mânerul în jos. Tuburile de cultură sunt semnate în prealabil , indicând data inoculării, numărul studiului și denumirea culturii.
Culturi „gazon” produse pe un mediu nutritiv dens într-o cutie Petri. Pentru a face acest lucru, după ce a deschis ușor capacul cu mâna stângă, inoculul este aplicat cu o buclă sau o pipetă pe suprafața agarului nutritiv conform metodei Drygalsky. După incubarea însămânțării, apare o creștere uniformă și continuă a bacteriilor cu împărțirea lor în colonii. Identificarea culturilor bacteriene izolate se realizează prin studierea morfologiei bacteriilor, a caracteristicilor culturale, biochimice și a altor caracteristici inerente fiecărei specii.
O colonie este o acumulare izolată vizibilă de reprezentanți ai unui tip de microorganisme, formată prin reproducerea unei unități formatoare de colonii ( CFU ) pe un mediu nutritiv solid (la suprafață sau în profunzime). Coloniile de bacterii de diferite specii diferă unele de altele prin morfologie, culoare și alte caracteristici culturale.
Coloniile [3] diferă ca mărime, formă, culoare, consistență, conturul marginilor, structură și caracterul suprafeței:
Într-un mediu nutritiv lichid, unele culturi bacteriene dau turbiditate difuză, în timp ce altele se caracterizează prin creștere parietală aproape de fund. Unele culturi formează pelicule pe suprafața mediului, altele formează un precipitat la fundul tubului.
Cultivarea anaerobilor diferă semnificativ de cultivarea aerobilor : deoarece atmosfera conține o cantitate semnificativă de oxigen , tehnici speciale de însămânțare, medii și un anaerostat sunt folosite pentru a o îndepărta din mediu [3] .