Microcip de proteine

Versiunea actuală a paginii nu a fost încă revizuită de colaboratori experimentați și poate diferi semnificativ de versiunea revizuită pe 21 decembrie 2017; verificările necesită 19 modificări .

Microcipul de proteine ​​este o tehnologie folosită în biologia moleculară. Un microcip proteic este un suport (bază) solid pe care mii de proteine ​​diferite ( antigeni , anticorpi , enzime etc.) sunt atașate covalent în diferite puncte ale microcipului. Fiecare proteină individuală formează o zonă cu concentrația sa ridicată pe microarray. Această tehnologie este foarte asemănătoare cu tehnologia ADN microarray , doar proteinele acționează ca sonde , mai degrabă decât molecule de ADN monocatenar.

Tipuri de microarrays de proteine

În prezent, trei tipuri de micromatrice de proteine ​​sunt utilizate relativ pe scară largă: micromatrice analitice, funcționale și în fază inversă. [unu]

Microarrays analitice

Aceste micromatrice sunt utilizate în mod obișnuit pentru profilarea unui amestec complex de proteine: măsurarea afinității, specificității și a nivelului de exprimare a proteinei în amestec. În această tehnică, biblioteci de anticorpi , aptameri , antigeni sunt depuse pe substraturi solide care formează baza unui microcip. Apoi, un astfel de cip este scufundat într-un amestec de proteine ​​pentru care este necesar să se profileze. Micromatricele de proteine ​​care foloseau anticorpi au fost cele mai comune în anii 00 ai secolului XXI. [2] Micromatricele analitice pot fi folosite pentru a căuta expresia diferențială și în diagnosticul clinic. Un exemplu este compararea țesuturilor sănătoase și bolnave, precum și răspunsul țesuturilor la condițiile de mediu în schimbare [3] .

Microcipuri funcționale

Acest tip de microcip diferă de cele analitice prin faptul că proteinele sau domeniile complet funcționale sunt situate pe o bază solidă, și nu o triadă analitică (anticorpi, aptameri, antigeni). Astfel de microarrays fac posibilă analiza activității biochimice a întregului proteom într-un singur experiment. În plus, ele sunt folosite pentru a studia numeroase interacțiuni ale proteinelor cu alte proteine, ADN, ARN, lipide, liganzi cu greutate moleculară mică [4] [5] .

Microcipuri cu fază inversă (RPM)

La fabricarea microcipurilor de acest tip, celulele izolate din diferite țesuturi suferă liză. Lizatul este aplicat pe membrana de nitroceluloză folosind o mașină specială - formând un microcip, apoi fiecare celulă a microcipului rezultat este analizată de diferiți anticorpi împotriva proteinei de interes. Acest tip de microarray face posibilă detectarea proteinelor, sau modificărilor conformaționale ale acestora, care apar doar în timpul anumitor boli [6] .

Note

  1. David A. Hall, Jason Ptacek, Michael Snyder. Tehnologia Microarray de proteine  ​​// Mecanisme de îmbătrânire și dezvoltare. — 2007-1. - T. 128 , nr. 1 . — S. 161–167 . — ISSN 0047-6374 . - doi : 10.1016/j.mad.2006.11.021 . Arhivat din original pe 10 ianuarie 2016.
  2. Paul Bertone, Michael Snyder. Progrese în tehnologia microarray-urilor de proteine ​​​​funcționale  // Jurnalul FEBS. - noiembrie 2005. - T. 272 ​​, nr. 21 . — S. 5400–5411 . — ISSN 1742-464X . - doi : 10.1111/j.1742-4658.2005.04970.x . Arhivat din original la 31 ianuarie 2018.
  3. A. Sreekumar, M. K. Nyati, S. Varambally, T. R. Barrette, D. Ghosh. Profilarea celulelor canceroase folosind microarrays de proteine: descoperirea unor noi proteine ​​reglate de radiații  // Cancer Research. — 15-10-2001. - T. 61 , nr. 20 . — S. 7585–7593 . — ISSN 0008-5472 . Arhivat din original la 31 ianuarie 2018.
  4. H. Zhu, M. Bilgin, R. Bangham, D. Hall, A. Casamayor. Analiza globală a activităților proteice folosind cipuri proteome  // Science (New York, NY). — 14-09-2001. - T. 293 , nr. 5537 . — S. 2101–2105 . — ISSN 0036-8075 . - doi : 10.1126/science.1062191 . Arhivat din original la 31 ianuarie 2018.
  5. David A. Hall, Heng Zhu, Xiaowei Zhu, Thomas Royce, Mark Gerstein. Reglarea expresiei genelor de către o enzimă metabolică  // Science (New York, NY). — 15-10-2004. - T. 306 , nr. 5695 . — S. 482–484 . — ISSN 1095-9203 . - doi : 10.1126/science.1096773 . Arhivat din original pe 5 iunie 2018.
  6. Runa Speer, Julia D. Wulfkuhle, Lance A. Liotta, Emanuel F. Petricoin. Micromatrice de proteine ​​în fază inversă pentru analiza bazată pe țesuturi  // Opinia curentă în terapie moleculară. - iunie 2005. - T. 7 , nr. 3 . — S. 240–245 . — ISSN 1464-8431 . Arhivat din original pe 5 iunie 2018.