Diagrama Lineweaver-Burke

Diagrama Lineweaver-Burk , de asemenea Lineweaver-Burk sau diagrama dublelor reciproce , este o metodă grafică de reprezentare a ecuației Lineweaver-Burk care caracterizează cinetica unei enzime. Folosit în biochimie și enzimologie. Metoda a fost descrisă pentru prima dată de Hans Lineweaver și Dean Burke în 1934 [1] .

Pentru o reprezentare grafică mai convenabilă a datelor experimentale, Lineweaver și Burke au transformat ecuația Briggs-Haldane (derivarea ecuației Michaelis-Menten) conform metodei dublelor reciproce, bazată pe principiul că dacă există o egalitate între oricare două cantități, atunci și reciprocele vor fi egale.

Graficul Lineweaver-Burk este corect atunci când cinetica enzimei urmează cinetica reacțiilor ideale de ordinul doi, dar regresia neliniară este necesară pentru sistemele care nu se comportă ideal. Graficul invers dublu distorsionează tiparul erorilor de date și, prin urmare, nu este instrumentul cel mai precis pentru determinarea parametrilor cinetici ai enzimelor. Pentru a calcula parametrii, se utilizează de obicei regresia neliniară sau forme liniare alternative ale ecuației Michaelis-Menten , cum ar fi diagrama Haynes-Wulff sau diagrama Eady-Hofstey [2] .

Concluzie

Reprezentarea grafică a ecuației Lineweaver-Burk este o linie dreaptă care corespunde formei: y = ax + b. Să transformăm ecuația Michaelis-Menten într-o formă liniară, pentru un calcul mai convenabil al valorilor V max și K m . În special dacă:

apoi

care se numește ecuația Lineweaver-Burk.

Acum, în conformitate cu această ecuație, puteți construi un grafic în coordonatele 1/V (y) din 1/[S] (x) [3] , în timp ce obținem o dreaptă, tangenta unghiului de pantă care va să fie egală cu valoarea K m /V max ; segmentul tăiat de o linie dreaptă de pe axa y este 1/V max (reciproca vitezei maxime). Dacă continuăm linia dreaptă dincolo de axa y, atunci segmentul corespunzător inversei constantei Michaelis -1 / K m este tăiat pe abscisă . Astfel, valoarea lui Km poate fi calculată din datele pantei dreptei și lungimea segmentului tăiat din axa ordonatelor sau din lungimea segmentului tăiat din axa absciselor în zona negativului. valorile.

Note

1. ↑ Lineweaver, Hans; Burk, Dean (martie 1934). „Determinarea constantelor de disociere a enzimelor” . Jurnalul Societății Americane de Chimie ]. 56 (3): 658-666. DOI : 10.1021/ja01318a036 . ISSN 0002-7863 . Arhivat din original pe 16.09.2021 . Preluat 2021-10-04 .  Parametrul depreciat folosit |deadlink=( ajutor )
2. ↑ Greco, WR; Hakala, M.T. (10.12.1979). „Evaluarea metodelor de estimare a constantei de disociere a inhibitorilor de enzime cu legare strânsă”. Jurnalul de chimie biologică . 254 (23): 12104-12109. DOI : 10.1016/S0021-9258(19)86435-9 . ISSN  0021-9258 . PMID  500698 .
3. ↑ Christensen, Siegfried B.; DeWolf, Walter E.; Ryan, M. Dominic & Torphy, Theodore J. (1996-01-01), Schudt, Christian; Dent, Gordon & Rabe, Klaus F., eds., 13 - Molecular Aspects of Inhibitor Interaction with PDE4 , Handbook of Immunopharmacology, San Diego: Academic Press, p. 185–207, ISBN 978-0-12-210720-7 , doi : 10.1016/b978-012210720-7/50015-0 , < http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B97801220707 > . Preluat la 15 decembrie 2020. Arhivat 4 octombrie 2021 la Wayback Machine