Activitate stelară

Activitatea stelară este un fenomen de scădere sau modificare a specificității endonucleazelor de restricție , care duce la tăierea (restricția) nediscriminată  a ADN-ului în timpul reacției in vitro . Activitatea stelară are loc în condiții care sunt diferite de cele optime pentru o anumită enzimă. Ca urmare a activității stelare, restricția are loc în siturile necanonice, uneori există o pierdere completă a specificității.

Motivele activității stelare pot fi:

• putere ionică scăzută a  soluției tampon,
• pH ridicat ,
• concentrație mare de  glicerol (> 5% v/v),
• prezența dimetilsulfoxidului (DMSO) ,
• prezența Mg 2+ (în cazul endonucleazei HindIII ), etc. [1]

O concentrație mare de glicerol este deosebit de importantă în practica de laborator, deoarece endonucleazele de restricție disponibile comercial sunt de obicei furnizate într- un tampon care conține o cantitate semnificativă de glicerol (50% v/v). Prin urmare, diluarea insuficientă a soluției de enzimă poate duce la activitate stelară. 

Link- uri externe

• Star Activity Arhivat pe 11 ianuarie 2018 la Wayback Machine - New England Biolabs
• Star Activity (Relaxarea specificității) Arhivat 27 septembrie 2009 la Wayback Machine - Fermentas
• Activitatea stelei a enzimelor de restricție - o listă detaliată a activităților stelare de la TaKaRa
• H; Wei; Therrien, C; Blanchard, A; Guan, S; Zhu, Z. Indicele de fidelitate oferă o cuantificare sistematică a activității stelare a endonucleazelor de restricție ADN   // Cercetarea acizilor nucleici : jurnal. - 2008. - Vol. 36 , nr. 9 . — P.e50 _ - doi : 10.1093/nar/gkn182 . — PMID 18413342 .

Link -uri

1. ↑ Robinson, CR; Sliger, SG Recunoașterea moleculară mediată de apă legată: un mecanism pentru activitatea stelară a endonucleazei de restricție EcoRI  //  Journal of Molecular Biology : jurnal. - 1993. - Vol. 234 , nr. 2 . - P. 302-306 . - doi : 10.1006/jmbi.1993.1586 . — PMID 8230215 .