Fotoalbire

Versiunea actuală a paginii nu a fost încă examinată de colaboratori experimentați și poate diferi semnificativ de versiunea revizuită pe 8 iulie 2019; verificarea necesită 1 editare .

Fotoalbirea ( fotodecolorare, albire ușoară ) este distrugerea fotochimică a unui fluorofor . În microscopie , fotoalbirea poate face dificilă observarea moleculelor fluorescente , deoarece acestea din urmă sunt distruse în timp atunci când sunt iradiate cu lumină care provoacă fluorescență.

Fotoalbirea poate fi utilizată înainte de aplicarea fluoroforilor cuplati cu anticorpi pentru a stinge autofluorescența, reducând astfel nivelul semnalului de fundal.

Albirea cu lumină poate fi utilizată pentru a studia mișcarea sau difuzia moleculelor, de exemplu, folosind ( ing. FRAP , Fluorescence recovery after photobleaching ) sau ( ing. FLIP , Fluorescence loss in photobleaching ).

Reducerea efectului fotoalbirii poate fi controlată prin reducerea intensității sau duratei expunerii la lumină, creșterea concentrației fluoroforului, reducerea frecvenței (și a energiei fotonice) a luminii absorbite sau folosind fluorofori care sunt mai rezistenți la degradare, cum ar fi ca Alexa sau DyLight Fluor.

Durata

În funcție de chimia lor particulară, moleculele pot foto-albire după ce au absorbit doar câțiva fotoni, în timp ce moleculele mai puternice pot trece prin multe cicluri de absorbție/emisie înainte de a se descompune:

Proteină verde fluorescentă ( ing. GFP ) : 104-105 ; 0,1-1s
Colorant organic comun : 105-106 ; 1-10 s
CdSe/ZnS: 108 ; > 1000 de minute

Link -uri

Introducere în microscopia optică . Articol de albire foto (în engleză)
Viegas MS, Martins TC, Seco F., do Carmo A. O metodologie îmbunătățită și rentabilă pentru reducerea autofluorescenței în studiile de imunofluorescență directă asupra țesuturilor înglobate în parafină fixate în formalină (engleză) // Eur J Histochem : journal. - 2007. - Vol. 51 , nr. 1 . - P. 59-66 . — PMID 17548270 .