X-gal

5-brom-4-clor-3-indoil-beta-D-galactopiranozida
General

Nume sistematic
5-brom-4-clor-3-indoil-beta-D-galactopiranozida
Chim. formulă C14H15BrCIN06 _ _ _ _ _
Proprietăți fizice
Masă molară 408,629 g/ mol
Clasificare
Reg. numar CAS 7240-90-6
PubChem
Reg. numărul EINECS 230-640-8
ZÂMBETE   C1=CC(=C(C2=C1NC=C2O[C@H]3[C@@H]([C@H]([C@H]([C@H](O3)CO)O)O )O)Cl)Br
InChI   InChI=1S/C14H15BrClNO6/c15-5-1-2-6-9(10(5)16)7(3-17-6)22-14-13(21)12(20)11(19)8( 4-18)23-14/h1-3,8,11-14,17-21H,4H2/t8-,11+,12+,13-,14-/m1/s1OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N
CHEBI 75055
ChemSpider
Datele se bazează pe condiții standard (25 °C, 100 kPa), dacă nu este menționat altfel.
 Fișiere media la Wikimedia Commons

X-gal (de asemenea BCIG din engleză  bromo-chloro-indolyl-galactopyranoside ) este un compus organic format din galactoză combinată cu indol . Este folosit pe scară largă ca substrat pentru beta-galactozidaze în inginerie genetică și biologie moleculară .

Aplicație

Clonarea

X-gal este utilizat în donarea genelor pentru a determina expresia celulară a enzimei β-galactozidazei codificate în gena lacZ .

X-gal este scindat de β-galactozidaze pentru a forma galactoză și 5-brom-4-clor-3-hidroxiindol. Acesta din urmă oxidează la 5,5'-dibromo-4,4'-dicloro-indigo, un produs colorat insolubil. X-gal este adăugat într-un vas Petri sau într-un balon de cultură împreună cu un inductor de p-galactozidază, cum ar fi IPTG .

X-gal vă permite să determinați vizual care colonii de E. coli au fost transformate cu vectorul dorit. În mod normal, în celulele E. coli , enzima codificată de gena lacZ este sintetizată sub acțiunea inductorului IPTG, iar colorarea albastră este pierdută în celulele care conțin un construct modificat genetic în care gena lacZ este perturbată ca urmare a unei genetice. inserare.

Reporter

Gena lacZ poate fi utilizată ca reporter atunci când bacteriile sau drojdia sunt cultivate pe un mediu care conține X-gal. Când promotorul genei țintă este legat de porțiunea de codificare a genei galactozidazei, legarea proteinei activatoare la promotor are ca rezultat formarea unui produs de scindare X-gal colorat. [unu]

Explorarea apei

X-Gal este utilizat pentru a detecta E. coli și bacteriile înrudite în probele de apă.

Note

  1. ^ Joung J., Ramm E., Pabo C. A bacterian two-hibrid selection system for studying protein-ADN and protein-protein interactions  // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America  :  journal . - 2000. - Vol. 97 , nr. 13 . - P. 7382-7387 . - doi : 10.1073/pnas.110149297 . — PMID 10852947 .