Kvanteferon

Quantiferon (uneori quantiferon, test quantiferon; engleză  QuantiFERON ) este denumirea comercială pentru un test de diagnosticare imunoenzimatică pentru infecția tuberculoasă , produs de compania germană QIAGEN . Testul folosește tehnologia ELISA pentru a detecta răspunsul imun interferon gamma.

În 2010, a fost aprobat pentru utilizare în Rusia, testul a primit un certificat de înregistrare pentru un dispozitiv medical FSS 2010/06376 din 03/04/2010 [1]

Descriere

Testul de eliberare a interferonului gamma (IGRA) este un instrument de diagnostic pentru infecția tuberculoasă  activă sau latentă [ 2] . Testul înlocuiește markerii infecției cu Mycobacterium tuberculosis și indică un răspuns imun celularla Mycobacterium tuberculosis. Testul nu face distincție între infecția ocultă și boala TB activă și nu ar trebui utilizat ca metodă unică de diagnosticare a TB activă, pentru care se utilizează diagnosticul microbiologic. Un rezultat pozitiv al testului nu indică neapărat infecția cu tuberculoză (TB), dar poate fi cauzat și de infecția cu micobacterii non-tuberculoase . Un test negativ nu exclude boala TBC activă. Sensibilitatea testului este de 70−80% [3] .

Acest test este independent de starea de vaccinare Calmette-Guérin (BCG) și este preferat față de testarea tuberculină cutanată (TT) pentru a evalua infecția latentă cu TB la indivizii vaccinați cu BCG . Dar el, ca și TT, nu este adaptat pentru a detecta tuberculoza activă [4] .

Aplicație

Analiza relevă un gamma-interferon specific pentru diagnosticul tuberculozei. În 1999, Sudha Pottumarthy , împreună  cu alți cercetători, pe baza studiului, a sugerat o posibilă înlocuire a testului Mantoux cu un test quantiferon [5] . În 2001, Departamentul de Sănătate și Servicii Umane din SUA a aprobat Quanteferon pentru utilizare [6] (statutul a fost retras în timpul unei părți a anului 2016 [7] ). Testul quantiferon este utilizat în studiile clinice ale noilor vaccinuri antituberculoase [8] [9] .

Metoda IGRA și Quantiferon în sine sunt concepute pentru a evalua răspunsul imun celular la stimularea cu antigene peptidice - proteine  ​​micobacteriene . Pentru a face acest lucru, se folosesc peptidele ESAT-6 și CFP-10 (acești antigeni sunt prezenți în M. tuberculosis, dar sunt absenți în toate tulpinile BCG și în majoritatea micobacteriilor netuberculoase). Sângele persoanelor infectate cu complexul M. tuberculosis conține de obicei limfocite care recunosc acestea și alte antigene micobacteriene. Acest proces de recunoaștere implică formarea și secreția de interferon gamma . Testul QuantiFERON-TB Gold se bazează pe determinarea cantitativă a interferonului gamma prin imunotest enzimatic pentru a evalua răspunsurile imune in vitro la antigenele peptidice foarte specifice la M. tuberculosis.

QFT este un test indirect pentru infecția cu M. tuberculosis (inclusiv boala în sine). Interpretarea rezultatelor testelor ar trebui să fie însoțită de evaluarea riscurilor, radiografie și alte teste de diagnostic medical.

Numele testului

Numele provine de la numele său original QuantiFERON, cunoscut și sub numele de QFN și este o marcă înregistrată.

Principiul testului

Potrivit producătorului, QuantiFERON-TB Gold (QFT) se bazează pe un test imunosorbent legat de enzime ( ELISA ) a  sângelui integral, care evaluează răspunsul imun mediat de celule la persoanele infectate cu TB prin evaluarea eliberării de interferon gamma IFN- y (IGRA). Testul folosește un amestec de peptide care imită proteinele ESAT -6 și CFP-10 ale agentului patogen al tuberculozei. Rezultatul este raportat ca o cuantificare ELISA-gamma în unități internaționale (UI) per ml. Un individ este considerat infectat pozitiv cu tuberculoză dacă răspunsul ELISA-gamma la antigenele TB este peste limitele de control (după scăderea răspunsului gamma-ELISA de fond în controlul negativ) [10] .

Sistemul QFT include tuburi speciale concepute pentru colectarea probelor de sânge integral prin puncție venoasă standard . Tuburile conțin antigene caracteristice M. tuberculosis și tuburi de control. Incubarea tuburilor cu probe de sânge durează 16-24 ore, apoi plasma este separată și examinată pentru prezența interferonului gamma în ea, care se formează ca răspuns imun la antigenele peptidice.

Testul QFT constă din două etape. Primul pas este colectarea probelor de sânge integral în mai multe tuburi de vid QFT, și anume un tub de control zero, un tub de antigen specific (antigen TB) și un tub de mitogen. Tubul mitogen poate fi folosit ca control pozitiv. Acest lucru este util mai ales dacă starea imunitară a pacientului este neclară. În plus, tubul mitogen poate fi utilizat pentru a monitoriza manipularea și incubarea corectă a probei de sânge.

Tuburile sunt incubate la 37±1 °C. După incubare timp de 16-24 de ore, tuburile sunt centrifugate. În a doua etapă, se prelevează plasmă de sânge și se determină cantitatea de gamma-interferon (în UI/ml) prin imunotest enzimatic (ELISA, ing.  ELISA ). Rezultatul obţinut este interpretat conform algoritmului stabilit.

Avantaje și dezavantaje

Beneficiile testului:

• este necesară o singură vizită la pacient pentru prelevarea de sânge
• rezultatele pot fi gata în 24 de ore
• nu interferează cu alte reacții de testare care pot apărea, de exemplu, cu testele cutanate la tuberculină (TST)
• nu este supus evaluării subiective, așa cum se poate întâmpla cu TST
• independent de vaccinarea anterioară BCG
• nu afectează rezultatele testelor ulterioare
• nu necesită introducerea de medicamente sau vaccinuri
• cel mai mic procent de rezultate incorecte este de aproximativ 2% ( Mantoux  este de aproximativ 30%, pentru comparație)
• nu are contraindicații de utilizare

Dezavantaje și limitări ale testului:

• probele de sânge trebuie procesate în 12 ore de la recoltare și în timp ce celulele albe din sânge sunt încă viabile
• Există date limitate despre utilizarea Quanteferon la copiii cu vârsta sub 17 ani, printre cei expuși recent la Mycobacterium tuberculosis și printre cei cu imunitate afectată (de exemplu, funcționarea afectată a sistemului imunitar cauzată de infecția cu HIV sau sindromul imunodeficienței dobândite SIDA , tratamentul curent). cu medicamente imunosupresoare, anumite tulburări hematologice, afecțiuni maligne specifice, diabet, silicoză și insuficiență renală cronică)
• erorile în colectarea și transportul probelor de sânge sau în efectuarea și interpretarea testului pot reduce acuratețea testului
• date insuficiente privind utilizarea Quanteferon pentru a determina cine este expus riscului de a dezvolta boala
• rezultate fals pozitive [11] , inclusiv cele datorate Mycobacterium szulgai , Mycobacterium kansasii și Mycobacterium Marinum

Vezi și

• Tuberculoză
• testul la tuberculina
• Punctul T
• Testul de eliberare a interferonului  gamma

Note

1. ↑ Certificat de înregistrare Nr. FSZ 2010/06376  : pdf // Serviciul Federal de Supraveghere în Sănătate și Dezvoltare Socială . - 2010. - 4 martie.
2. ↑ LabTests .
3. ↑ Pottumarthy, Sudha. Evaluarea testului Tuberculin Gamma Interferon: Potenţial de înlocuire a testului cutanat Mantoux  : [ ing. ]  : pdf / Sudha Pottumarthy, Arthur J. Morris, Adrian C. Harrison … [ și colab. ] // Journal of Clinical Microbiology : journal .. - 1999. - Vol. 37, nr. 10 (octombrie). - P. 3229-3232. — PMID 10488182 . — PMC 85534 .
4. ↑ Document de poziție al OMS – februarie 2018 , p. 80−81.
5. ↑ Sudha Pottumarthy. Evaluarea testului Tuberculin Gamma Interferon  : Potenţial de înlocuire a testului cutanat Mantoux: [ ing. ]  / Sudha Pottumarthy, Arthur J. Morris, Adrian C. Harrison … [ și colab. ] // Jurnalul de microbiologie clinică. - 1999. - Vol. 37, nr. 10 (octombrie). - P. 3229-3232. — PMID 10488182 . — PMC 85534 .
6. ↑ QuantiFERON®-TB -  P010033 . FDA, aprobări și autorizații pentru dispozitive . Data accesului: 18 ianuarie 2019. Arhivat din original pe 24 februarie 2012.
   Scrisoare de aprobare (pdf). FDA (28 noiembrie 2001). Consultat la 18 ianuarie 2019. Arhivat din original la 12 februarie 2017. (Rusă)
7. ↑ Rechemare dispozitiv de clasa 2 QuantiFERON TBGold . FDA . Preluat: 18 ianuarie 2019. (Rusă)
8. ↑ Global tuberculosis report 2013 Arhivat la 2 februarie 2017 la Wayback Machine , OMS, (Global tuberculosis report 2013.) ISBN 978 92 4 456465 3
9. ↑ Jason M. Lempp. Evaluarea testului QuantiFERON-TB Gold In-Tube pentru detectarea infecției cu Mycobacterium tuberculosis la recruții din Marina Statelor Unite : [ ing. ]  / Jason M. Lempp, Margan J. Zajdowicz, Arlene L. Hankinson … [ și colab. ] // PLoS One : J .. - 2017. - Vol. 12, nr. 5 (17 mai). - doi : 10.1371/journal.pone.0177752 . — PMID 28545136 . — PMC 5435309 .
10. ↑ Manual QFT®-Plus .
11. ↑ Copie arhivată . Preluat la 14 ianuarie 2017. Arhivat din original la 16 ianuarie 2017. (nedefinit)

Link -uri

• QuantiFERON®-TB - P010033  (engleză) . FDA, aprobări și autorizații pentru dispozitive (2001). Data accesului: 18 ianuarie 2019. Arhivat din original pe 24 februarie 2012.
• Ghid pentru utilizarea testului QuantiFERON®-TB Gold pentru detectarea infecției cu Mycobacterium tuberculosis, Statele  Unite ale Americii . Raport săptămânal privind morbiditatea și mortalitatea . Centers for Disease Control and Prevention, SUA (16 decembrie 2005). — Pregătit de Gerald H. Mazurek, MD, John Jereb, MD, Phillip LoBue, MD, Michael F. Iademarco, MD, Beverly Metchock, dr., Andrew Vernon, MD Divizia de Eliminare a Tuberculozei, Centrul Național pentru HIV, STD și TBC prevenirea. Preluat la 18 ianuarie 2019. Arhivat din original la 10 martie 2011.
• prospect ELISA QuantiFERON®-TB Gold Plus (QFT®-Plus) . Test pentru a determina răspunsul celular la antigenele peptidice ESAT-6 și CFP-10 prin nivelul de IFN-γ din sângele integral uman. (pdf)  (link indisponibil) . quantiferon.com (februarie 2015) . Data accesului: 18 ianuarie 2019. Arhivat din original pe 2 februarie 2017. (Rusă)
•  Testul IGRA TB . Teste de laborator online . Asociația Americană pentru Chimie Clinică (AACC) (2018-12-27.). Preluat la 29 decembrie 2018. Arhivat din original la 30 decembrie 2018.
• Vaccinuri BCG . // Document de poziție al OMS – februarie 2018  (ing.) (pdf) . CINE . CINE .  - Vaccin BCG. Document de poziție al Organizației Mondiale a Sănătății. Februarie 2018. Consultat la 29 decembrie 2018. Arhivat din original la 16 mai 2018.