Colorație Romanovsky-Giemsa
Versiunea actuală a paginii nu a fost încă examinată de colaboratori experimentați și poate diferi semnificativ de versiunea revizuită pe 15 iulie 2019; verificările necesită 2 modificări .Colorația Romanovsky - Giemsa este o metodă citologică de colorare a microorganismelor , structurilor celulare și țesuturilor de diferite tipuri (inclusiv sânge ) pentru examinare prin microscopie luminoasă . Propus în 1904 [1] de Gustav Giemsa . În versiunea autorului, numele colorantului este „Giemsasche Lösung für die Romanowsky Färbung” (soluție Giemsa pentru colorare după Romanovsky) [2] . Colorează formațiunile acidofile în diferite nuanțe de roșu, formațiuni bazofile în culori de la violet la albastru.
Pregătirea vopselei
Înainte de colorarea frotiurilor, colorantul lichid finit este diluat cu o rată de 1-2 picături de colorant la 1 ml de apă distilată. Frotiurile sunt colorate timp de 20-25 minute la 37°C într-o cameră umedă (cuvă Petri închisă cu un filtru umezit în partea de jos). După colorare, frotiurile sunt spălate în apă curentă, uscate la aer și examinate prin imersie în ulei.
Amestecul colorant Romanovsky-Giemsa, care se bazează pe vopseaua Romanovsky-Wright , sub formă de pulbere (colorant comercial) este dizolvat într-un amestec de volume egale de alcool metilic și glicerină (800 mg de colorant la 100 ml de solvent ). ). Colorantul se dizolvă slab, așa că este mai bine să-l măcinați cu un solvent în cantitate de 300 mg la 100 ml, apoi, amestecând, adăugați colorantul până când se obține concentrația dorită. Pregătirea vopselei durează adesea câteva zile. Este important să folosiți ca solvenți alcool metilic și glicerină pur chimic, deoarece impuritățile degradează proprietățile colorantului. În loc de alcool metilic, se poate folosi alcool etilic 100%. Amestecul de colorant preparat este depozitat într-un loc uscat și răcoros într-un vas bine închis.
Soluție standard specială Giemsa
- Compoziția vopselei:
Tehnica de colorare
- Frotiurile fixate în alcool metilic se colorează cu o soluție (1 ml de vopsea lichidă finită + 2 ml de soluție tampon de bază + 47 ml de apă distilată) timp de 40-120 de minute (durata colorării este selectată empiric). Se folosește tampon fosfat, dar pH-ul tamponului depinde de tipul de frotiu: pentru un frotiu de măduvă osoasă - 5,8-6,0, pentru un frotiu de sânge - 6,4-6,5, pentru detectarea protozoarelor - 6,8, plasmodium malaric - 7, 0-7,2.
- Clătiți în apă distilată, uscați și examinați prin imersare.
Rezultat colorare
Bacteriile colorează roșu-violet, albastru citoplasma celulară, nucleii roșu. La colorarea protozoarelor, citoplasma lor devine albastră, iar nucleii devin roșu-violet.
Rezultatele colorării cu frotiu de sânge
- citoplasma limfocitelor colorează albastru-albastru, nucleele lor - în culori de la violet intens la violet;
- citoplasma monocitelor este colorată într-o culoare cenușiu-albăstruie tulbure, nucleele lor - într-o granularitate azurofilă delicată violet-roșu mai deschis;
- granulele de bazofile sunt colorate într-o culoare albastru-violet intens;
- granulele de eozinofile colorează portocaliu-roz;
- granulele de neutrofile sunt colorate în culori de la violet la violet;
- nucleii leucocitelor sunt de culoare roșie-violet cu o structură cromatinică clar vizibilă; nucleolii sunt bine distinși;
- granulomerii trombocitar colorați în roșu, hialomerii colorați în albastru;
- culoarea roz a hemoglobinei .
Vezi și
Note
- ↑ Giemsa G. Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenazur-Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nochtschen Chromatinfärbung. (germană) // Centralbl f Bakt etc: magazin. - 1904. - Bd. 37 . - S. 308-311 .
- ↑ Bezrukov A. V. Colorarea după Romanovsky: la problema priorității / La 120 de ani de la descoperirea efectului Romanovsky. - 12 s. (link indisponibil)
 Dicționare și enciclopedii |
|
|---|