Amplificarea recombinazei polimerazei

Amplificarea recombinazei polimerazei ( în engleză  Recombinase Polymerase Amplification , RPA) este o alternativă la reacția în lanț a polimerazei . Tehnologia RPA asigură înmulțirea materialului genetic în mai puțin de 15 minute [1] , iar reacția în sine se realizează în condiții izoterme . Prin adăugarea transcriptazei inverse la amestecul de reacție prin intermediul RPA, este posibil să se detecteze ARN , precum și ADN fără a fi nevoie de o procedură separată de preparare a ADNc . Deoarece reacția este izotermă, se pot folosi echipamente mai ieftine și mai simple pentru aceasta, în comparație cu PCR [2] [3] [4] [5] [6] [7] . Intervalul optim de temperatură este de 37-42 ° C, dar reacția se desfășoară la o viteză scăzută și la temperatura camerei. Acest avantaj face ca RPA să fie un candidat excelent pentru dezvoltarea de teste de diagnostic moleculare ieftine, rapide, bazate pe teren. Tehnica RPA a fost dezvoltată de TwistDX LTD, o companie de biotehnologie cu sediul în Cambridge, Marea Britanie.

Note

  1. ↑ TESTUL RAPID VA DETECTA ADN-UL VIRUSULUI FĂRĂ PCR . chemport.ru (04.02.2015). Consultat la 6 octombrie 2015. Arhivat din original pe 6 octombrie 2015.
  2. ↑ Zachary Austin Crannell, Brittany Rohrman, Rebecca Richards-Kortum. Cuantificarea ADN-ului HIV-1 utilizând amplificarea polimerazei recombinazei în timp real  // Chimie analitică. — 17.06.2014. - T. 86 , nr. 12 . - S. 5615-5619 . — ISSN 0003-2700 . - doi : 10.1021/ac5011298 .
  3. ↑ Liu, L., Wang, J., Geng, Y., Wang, J., Li, R., Shi, R. și Yuan, W. (2018). Testul de amplificare a polimerazei recombinaze fără echipament folosind căldura corporală pentru detectarea vizuală și rapidă la punctul de necesitate a parvovirusului canin 2. Sonde moleculare și celulare, 39, 41-46. PMID 29705183 PMC 7127419 doi : 10.1016/j.mcp.2018.04.004
  4. ↑ Qin, Z., Xue, L., Cai, W., Gao, J., Jiang, Y., Yang, J., ... și Wu, Q. (2021). Dezvoltarea unui test de amplificare asistată de recombinază pentru detectarea rapidă a norovirusului uman GII. 4. BMC Infectious Diseases, 21(1), 1-8. PMID 33750333 PMC 7941963 doi : 10.1186/s12879-021-05942-x
  5. ↑ Zhang, W., Feng, Y., Zhao, H., Yan, C., Feng, J., Gan, L., ... și Yuan, J. (2021). Un test de amplificare asistată de recombinază pentru detectarea rapidă a genei carbapenemazei Klebsiella pneumoniae și caracteristicile sale în Klebsiella pneumoniae. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology, 869. PMID 34616692 PMC 8488121 doi : 10.3389/fcimb.2021.746325
  6. ↑ Feng, Y., Xue, G., Feng, J., Yan, C., Cui, J., Gan, L., ... & Yuan, J. (2021). Detectarea rapidă a genei metalo-β-lactamazei din New Delhi utilizând amplificarea asistată de recombinază direct pe probe clinice de la copii. Frontiers in microbiology, 2087. PMID 34367092 PMC 8339468 doi : 10.3389/fmicb.2021.691289
  7. ↑ Li, F., He, P., Xiong, D., Lou, Y., Pu, Q., Zhang, H., ... & Yu, J. (2021). O metodă de amplificare asistată de recombinază cu transcripție inversă pentru detectarea rapidă și la punctul de îngrijire a SARS-CoV-2, inclusiv variante. Virusuri, 13(9), 1875. PMID 34578456 PMC 8472806 doi : 10.3390/v13091875