Albumina serică bovină

Versiunea actuală a paginii nu a fost încă examinată de colaboratori experimentați și poate diferi semnificativ de versiunea revizuită la 25 mai 2014; verificările necesită 12 modificări .

Albumina serică bovină (abreviată ca BSA , ing.  Albumina serică bovină, BSA ) este o proteină plasmatică bovină cu o greutate moleculară de 69.000 Da , monocatenar, constând din 607 reziduuri de aminoacizi .

Structură și proprietăți

Albumina serică bovină (BSA) este cea mai studiată și mai abundentă proteină din sânge (70% din compoziția totală a proteinelor). Concentrația sa plasmatică este de 35-55 mg/ml.

Albumina serică bovină este un glob sub formă de elipsoid oblat de revoluție cu semi-axe de 17 pe 42 de angstromi, constând din 607 resturi de aminoacizi, lista și numărul acestora sunt prezentate în tabel:

Ala 48 Cys 35 Asp 41 Glu 58
Phe 30 Gly 17 16 ai lui Ile 15
Lys 60 Leu 65 Intalnit 5 Asn 14
Pro 28 Gln 21 Arg 26 Ser 32
Thr 34 Val 38 Trp 2 Tyr 21

BSA are o structură spațială destul de complexă, formând trei domenii, fiecare dintre ele, la rândul său, subdivizat în două subdomenii (AB și C). Fiecare subdomeniu poate fi împărțit în 3 elice X, Y și Z. Structura secundară a BSA, conform datelor (1H RMN), constă din 50-68% elice alfa, 16-18% pliuri beta. Structura terțiară este formată din legături disulfurice, dintre care există 17 bucăți în molecula BSA (în funcție de numărul de resturi de aminoacizi de cisteină). Greutatea moleculară a BSA = ~69 kDa.

Este un model convenabil pentru studierea proprietăților proteinelor globulare.

Aplicații în practica de laborator

Datorită disponibilității materiei prime, a procedurilor de izolare stabile și, ca urmare, a prețului relativ scăzut și a proprietăților binecunoscute, albumina serică bovină este utilizată pe scară largă în practica de laborator.

BSA este utilizat ca standard în diferite metode pentru determinarea cantitativă a proteinelor, ca standard pentru greutatea moleculară a proteinelor (marker) în cromatografia pe gel și electroforeza proteinelor în stare denaturată ( SDS-PAGE ) și, de asemenea, ca antigen standard. în determinarea modificărilor răspunsului imun sub influența imunomodulatoarelor sau a altor factori. De asemenea, este utilizat pentru a stabiliza anumite enzime, în special endonucleaze de restricție. Previne aderarea enzimelor la pereții vaselor.

Obținerea

Modalitati primitive:

  1. „În serul de sânge (sânge lipsit de fibrină), se toarnă apă într-o cantitate care este de douăzeci de ori volumul serului, apoi se precipită globulina prin adăugarea cu grijă de acid acetic. După ce a lăsat lichidul să se depună, acesta este filtrat și neutralizat cu sifon, evaporat la 40 ° și majoritatea sărurilor sunt izolate prin dializă.
  2. „În scopuri tehnice, se prepară prin sângerare directă de la animal în cupe de zinc puțin adânci, cu o capacitate de câțiva litri. Ei o răcoresc până se ghemuiește; trebuie avut grijă să nu se scuture sângele proaspăt extras, așa că locul unde se efectuează operația trebuie ales aproape de animal. Când sângele este complet coagulat, este transferat în aceleași vase cu fundul perforat și cheagul de sânge este tăiat în bucăți mici pentru a permite serului să se scurgă. Serul se colectează și se evaporă la temperatură moderată, reziduul se numește albumină. Orice agitare trebuie evitată, deoarece aceasta va rupe celulele roșii din sânge și va strica culoarea produsului. Cinci tauri produc aproximativ 20 de litri de ser și aproximativ 2 kg de albumină.”

Surse