Metoda biuretului

Metoda biuretului  este una dintre metodele colorimetrice pentru determinarea cantitativă a proteinelor în soluție. Dezvoltat în 1949 de Gornall, Bardaville și David, este acum puțin utilizat în practica de laborator biochimic (cu excepția testelor medicale de proteine) datorită sensibilității scăzute.

Principiul

Se bazează pe formarea unui complex de biuret (are culoare violet) de legături peptidice ale proteinelor cu ioni divalenți de cupru. Metoda folosește așa-numita. reactiv biuret, constând din KOH , CuSO4 și citrat de sodiu (sau tartrat de sodiu ). În complexul rezultat, cuprul este legat de 4 azoți prin legături de coordonare și de 2 oxigeni prin legături electrostatice. Un complex complet se formează numai cu peptide formate din mai mult de 4 reziduuri. Densitatea optică a soluției (direct proporțională cu concentrația peptidei) este determinată la 540-560 nm.

Avantajele metodei includ sensibilitatea sa scăzută la substanțele străine, eroarea scăzută.

Sensibilitatea metodei este de 2-10 mg/ml.

Alte metode

Literatură

Link -uri