Metoda Bradford este una dintre metodele colorimetrice pentru determinarea cantitativă a proteinelor în soluție. Propus de biochimistul Marion M. Bradford în 1976 . [1] [2] Articolul lui M. Bradford din revista Analytical Biochemistry , dedicat metodei de determinare cantitativă a proteinei în soluție, este unul dintre cele mai citate articole științifice din lume.
Metoda se bazează pe reacția colorantului Coomassie Brilliant Blue G-250 cu arginină și reziduuri hidrofobe de aminoacizi . Forma legată este albastră, cu un maxim de absorbție la 595 nm. Astfel, creșterea absorbției de lumină a soluției la o lungime de undă de 595 nm este proporțională cu cantitatea de proteină din soluție. [3]
Metoda dă o valoare bună a concentrației de proteine în intervalul de la 2 µg/ml până la 120 µg/ml (în aceste limite se observă o dependență liniară a creșterii absorbției de concentrație, în general, sensibilitatea metodei depinde de raportul dintre concentrațiile proteinei de determinat și colorantul: cu cât este mai mult colorant, cu atât metoda este mai sensibilă), mai puțin „fantezică” în comparație cu metoda Lowry .