Izotachoforeza

Izotachoforeza (ITP) este o metodă de separare a diferitelor tipuri de ioni pe baza mobilității lor într- un câmp electric . Cu ITF, toate tipurile de ioni migrează în aceeași direcție, formând un set de zone care se află într-o stare de echilibru și se mișcă cu aceeași viteză.

Fundamentele teoretice ale metodei

Metoda ITF se bazează pe un sistem format din trei electroliți diferiți , uniți printr-un contraion comun:

Dacă un curent electric este trecut prin acest sistem , atunci anionii vor fi aranjați în serie în conformitate cu mobilitatea lor electroforetică, conducând în regiunea anodică , închizându-se în regiunea catodică , restul dintre ei sub formă de zone înguste cu concentrație clară. limite. Lățimea zonelor individuale la sfârșitul procesului corespunde cantității absolute de unul sau altul anion din amestec .

Deoarece zonele individuale sunt aranjate în serie. sunt practic în contact, prin urmare, în proba de testare este introdus un tampon care conține un anion cu mobilitate intermediară , a cărui zonă va fi integrată în secvența rezultată și va împinge zonele anionilor studiati . Aceste zone auxiliare sunt numite distanțiere - separatoare, ale căror funcții sunt îndeplinite de amfoliții purtători utilizați în metoda IEF . O caracteristică a metodei ITF este că procesul este însoțit de concentrarea zonelor, al cărei efect duce la o rezoluție comparabilă și chiar superioară separării prin metoda IEF . Rezultatele separării amestecurilor prin metoda ITF sunt înregistrate pe banda de înregistrare sub forma unui grafic al măsurării a trei parametri:

Instrumente pentru izotachoforeză

Izotachoforeza analitică se efectuează într-un dispozitiv capilar pentru izotachoforeză, într-un capilar de teflon cu un diametru interior de 0,5 mm.

Izotachoforeza preparativă se efectuează într-o coloană cu gel de poliacrilamidă .

Aplicarea izotachoforezei

  1. Separarea analitică de înaltă rezoluție (μg) a peptidelor , proteinelor , nucleotidelor , acizilor organici , ionilor metalici ( parțial izotopi ).
  2. Separarea preparativă a proteinelor (d).
  3. Acumularea sub forma unei zone înguste de urme de substanțe (µg) din volume mari de probă datorită efectului concentrației.
  4. Determinarea mobilității electroforetice.

Literatură

K. Geckeler, H. Eckstein. Metode de laborator analitice si preparative: Ref. ed.: Perev. cu el. — M.: Chimie, 1994. — 416 p. bolnav.

Vezi și