N-etilmaleimidă

Versiunea actuală a paginii nu a fost încă examinată de colaboratori experimentați și poate diferi semnificativ de versiunea revizuită pe 13 octombrie 2019; verificarea necesită 1 editare .
N-etilmaleimidă
General

Nume sistematic		 1-Etilpirol-2,5-dionă
Abrevieri NEM
Nume tradiționale Etilmaleimidă
Chim. formulă C6H7NO2 _ _ _ _ _
Proprietăți fizice
Masă molară 125,12528 g/ mol
Proprietati termice
Temperatura
 •  topirea 43-46°C
 •  fierbere 210°C
Clasificare
Reg. numar CAS 128-53-0
PubChem 4362
Reg. numărul EINECS 204-892-4
ZÂMBETE   O=C1\C=C/C(=O)N1CC
InChI   1/C6H7NO2/c1-2-7-5(8)3-4-6(7)9/h3-4H,2H2,1H3HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N
CHEBI 44485
ChemSpider 4209
Datele se bazează pe condiții standard (25 °C, 100 kPa), dacă nu este menționat altfel.
 Fișiere media la Wikimedia Commons

N -Etilmaleimida (NEM) este un derivat al acidului maleic . Conține o grupare funcțională imidă și este o alchenă activatăcare reacționează cu tiolii și este adesea folosită pentru a modifica reziduurile de cisteină din proteine ​​și peptide [1] .

Proprietăți chimice

N -etilmaleimida este un acceptor Michael . Aceasta înseamnă că poate adăuga nucleofili, cum ar fi tiolii. Tioeterul format ca urmare a unei astfel de reacții are o legătură C-S foarte puternică, iar reacția este practic ireversibilă. Reacția are loc la pH 6,5-7,5. N -etilmaleimida poate reacționa cu aminele sau poate suferi hidroliză la pH mai bazic. N -etilmaleimida a fost utilizată pe scară largă pentru a determina rolul funcțional al grupărilor tiol în enzimologie . Este un inhibitor ireversibil al tuturor cistein-peptidazelor, deoarece efectuează alchilarea grupărilor tiol în centrul activ (vezi diagrama) [2] [3] .

Studii de caz

NEM blochează transportul vezicular . Tampoanele de liză cu 20-25 mM N -ethylmaleimidă sunt utilizate pentru a inhiba desumoilarea proteinei în timpul Western blot . NEM este, de asemenea, utilizat ca inhibitor de deubiquitinilare .

Arthur Kornberg și colegii săi au folosit N -ethylmaleimida pentru a opri ADN polimeraza III și a compara activitatea acesteia cu ADN polimeraza I. Kornberg a primit Premiul Nobel pentru descoperirea ADN polimerazei I, care la acea vreme era considerată principala polimerază a replicării bacteriene , deși mai târziu, fiul său Thomas a arătat că principala polimerază replicativă din bacterii este ADN polimeraza III, care nu a fost încă descoperită în acel moment.

N -etilmaleimida activează aportul de ioni de potasiu dependent de clor , insensibil la ouabaină, în globulele roșii ale oilor și caprelor [4] . Șaisprezece ani mai târziu, această descoperire a contribuit la descoperirea co -transportatorilor K + /Cl - în celulele embrionare umane, care au introdus izoformele cADN ale KCC1 [5] . De atunci, N -etilmaleimida a fost utilizată pe scară largă ca instrument de diagnostic pentru a determina prezența simporturilor K + /Cl - în celulele diferitelor specii de animale [6] [7] [8] [9] .

Note

  1. ↑ Sonde reactive cu tiol Arhivat din original pe 28 ianuarie 2008. la Invitrogen
  2. ↑ Nelson, D.L.; Cox, M. M. „Lehninger, Principiile biochimiei” Ed. a III-a. Worth Publishing: New York, 2000.
  3. ↑ Gregory, JD (1955) J. Am. Chim.
  4. ↑ Un flux K+ dependent de clorură indus de N etilmaleimidă în eritrocitele de oaie și capră cu K+ scăzut genetic.
  5. ↑ Gillen CM, Brill S, Payne JA, Forbush B 3rd: Clonarea moleculară și expresia funcțională a cotransportatorului K-Cl de la iepure, șobolan și om.
  6. ↑ Reglarea cotransportului K-Cl: de la funcție la gene.
  7. ↑ Cotransport K+ Cl: sulfhidril, cationi divalenți și mecanismul de activare a volumului într-o eritrocite.
  8. ↑ . doi : 10.1016/j.cell.2009.05.031 .
  9. ↑ Jennings, ML & Al-Rohil, NSJ gen. fiziol. 95, 1021−1040, 1990

Link- uri externe