Rhizobium radiobacter | ||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Micrografie electronică a Rhizobium radiobacter în procesul de infectare a unei celule de morcov , începutul transferului de plasmide | ||||||||
clasificare stiintifica | ||||||||
Domeniu:bacteriiTip de:ProteobacteriiClasă:Alfa ProteobacteriiOrdin:RhizobiumFamilie:RhizobiaceaeGen:RhizobiumVedere:Rhizobium radiobacter | ||||||||
Denumire științifică internațională | ||||||||
Rhizobium radiobacter ( Beijerinck și van Delden 1902) Young și colab. 2001 | ||||||||
Sinonime | ||||||||
conform LPSN [1] [2] :
|
||||||||
|
Rhizobium radiobacter (lat.) (cunoscut și sub numele de Agrobacterium tumefaciens ) este o specie de bacterii de sol gram-negative , în mod obligatoriu aerobe , în formă de bastonaș din genul Rhizobium . Capabil să transforme celulele vegetale folosind o plasmidă specială . Fitopatogenul determină formarea așa-numitelor fiere ale coroanei la plante, patogenitatea condiționată este cunoscută șila persoanele care suferă de boli de imunodeficiență, precum SIDA [3] . Folosit în inginerie genetică pentru transformarea plantelor.
Specia Rhizobium radiobacter a fost descrisă istoric ca două linii de sinonime.
În prima linie ( Rhizobium radiobacter ) a fost descris pentru prima dată de Beijerinck și van Delden în 1902 sub numele de Bacillus radiobacter . Apoi, taxonomiștii au transferat specia de mai multe ori către alte genuri: Löhnis în 1905 - în Bacterium , Primbran (Pribram) în 1933 - în Rhizobium , Bergey (Bergey) în 1934 - în Achromobacter , Conn (Conn) în 1939 - în Alcaligenes și .—la genul Rhizobium [2] .
În a doua linie ( Agrobacterium tumefaciens ), specia a fost descrisă pentru prima dată de Smith (Smith) și Townsend (Townsend) în 1907 sub denumirea de Bacterium tumefaciens (de la tumoră - „ tumoare ” și facere - „face, acționează”, denumirea reflectă capacitatea bacteriei de a provoca tumori vegetale). Au urmat mai multe transferuri către alte genuri ( Pseudomonas - Phytomonas - Polymonas ), până când în 1942 Conn a reclasificat specia sub denumirea de Agrobacterium tumefaciens [1] .
În 1993, Sawada și colab. au propus desființarea denumirii Agrobacterium tumefaciens (Smith et Townsend 1907) Conn 1942 ca sinonim târziu ilegitim pentru denumirea Agrobacterium radiobacter (Beijerinck și van Delden 1902) Conn 1942 , comisia conservată Agrobacterium [4] tumefaciens ca specie tip din genul Agrobacterium Conn 1942 [5] . În 2001, Young și colab. au propus transferul speciilor de Agrobacterium , inclusiv Agrobacterium tumefaciens , la genul Rhizobium , ceea ce a rezolvat problema epitetului de specie tumefaciens , care a încetat să fie eliminat după abolirea genului [6] și a ambelor linii de specii. sinonime fuzionate în Rhizobium radiobacter (Beijerinck și van Delden 1902) Young și colab. 2001 .
Bacterii drepte sau ușor curbate în formă de tijă, cu dimensiunea de 0,6–1,0 × 1,5–3,0 µm. Nu se formează spori , mobil. Purtați 1-4 flagelaperitrichial localizate. Aranjate individual sau în perechi.
Chemoorganoheterotrop , aerob obligat . Nu necesită factori specifici pentru creșterea pe medii nutritive artificiale. Capabil să folosească o gamă relativ mare de substanțe organice ca unică sursă de carbon ( N-acetilglucozamină , α - alanină , β-alanină, arabinoză , aspartat , dulcit etc.), capabile să crească în bulion LB. Pe medii nutritive de agar formează colonii convexe, rotunde, netede, nepigmentate sau ușor bej. Utilizați manitol și alți carbohidrați cu formarea de acid. Pe medii cu carbohidrați se observă mucus extracelular de natură polizaharidă . Sunt oxidaza -pozitivi , formează urează , nu formează indol [7] .
Genomul tulpinii C58 de R. radiobacter (descris și ca A. tumefaciens ) are o dimensiune de 5,67 Mb. și este format din doi cromozomi (circular și liniar [8] ) și două plasmide . Se remarcă un nivel ridicat de omologie cu genomul Sinorhizobium meliloti , sugerând o divergență evolutivă recentă [9] .
CromozomiCromozomul inel al tulpinii C58 de R. radiobacter are o dimensiune de 2841580 bp. și conține 2819 gene , dintre care 2765 codifică proteine [10] . Cromozomul liniar are o dimensiune de 2075577 bp. și conține 1884 de gene, dintre care 1851 codifică proteine [11] . Prezența unui cromozom circular și liniar este, de asemenea, caracteristică altor tulpini de R. radiobacter , cum ar fi tulpina MAFF301001 [12] .
PlasmideTulpina C58 de R. radiobacter conţine două plasmide: o plasmidă At şi o plasmidă Ti. Plasmida At (de la Agrobacterium tumefaciens ) este o moleculă circulară de ADN dublu catenară de 542.868 bp . și conține 557 de gene, dintre care 542 codifică proteine [13] . Ti-plasmida (din engleza tumor-inducing) determină patogenitatea R. radiobacter și este capabilă să se integreze în genomul plantei gazdă, transferând T-ADN în procesul de recombinare site-specific [14] [15] , plasmida se poate integra parțial în genomul Saccharomyces cerevisiae prin recombinare nelegitimă [16] . Cu toate acestea, infecția șoarecilor cu R. radiobacter patogen nu induce expresia genelor reporter în țesuturi [17] . Plasmida Ti a tulpinii C58 de R. radiobacter este o moleculă circulară de ADN dublu catenară cu dimensiunea de 214233 bp. și conține 199 de gene, dintre care 197 codifică proteine [18] . Ti-plasmida conține gene care controlează sinteza și catabolismul aminoacizilor specifici - opine [19] , care sunt utilizate de R. radiobacter ca sursă de nutriție (octopină, nopalină, agropină) [20] , gene de virulență, gene pt. sinteza fitohormonilor - citokinine și auxine (de fapt ele provoacă formarea tumorii și dediferențierea țesuturilor vegetale), ADN-ul în sine este o regiune integrabilă a plasmidei Ti purtătoare de gene pentru sinteza fitohormonilor și opinelor [21] .
R. radiobacter determină formarea așa-numitelor. fiere de coroană la plante. Formarea tumorii este asociată cu transferul T-ADN în genomul plantei cu transformarea sa ulterioară. Celulele transformate, din cauza unui dezechilibru în sinteza fitohormonilor, se dediferențiază și încep creșterea dezordonată. Celulele vegetale transformate încep, de asemenea, să sintetizeze opinele, pe care R. radiobacter le poate folosi ca sursă de hrană. Un anumit rol în inducerea exprimării genelor de virulență R. radiobacter cu planta gazdă îl au metaboliții specifici intracelulari ai plantei [22] , care sunt eliberați atunci când țesuturile plantei sunt rănite [23] . Un pas important în procesul patogenic este sinteza pilulelor T folosind sistemul de secreție de tip IV , care se realizează sub acțiunea operonului VirB . R. radiobacter se atașează de celula vegetală cu ajutorul pastilelor T , formând o punte de conjugare și, folosind proteina VirE1, transferă complexul proteic monocatenar T-DNA–VirE2 [24] (format preliminar din plasmida Ti). și legat de proteina VirE2 [25] ) în celula vegetală [26] [27] . De asemenea, transformarea celulelor vegetale este influențată de proteina specifică VirE3, care este transportată în nucleu împreună cu T-ADN și se leagă probabil de factorul de transcripție [28] . În nucleu, ADN-T este integrat în genomul celulei plantei gazdă [29] prin recombinare specifică locului [30] [31] . Introducerea ADN-ului T determină formarea unor tumori caracteristice din plante datorită hipersintezei fitohormonilor; opiniile încep să se acumuleze în țesuturile tumorale.
Datorită capacității R. radiobacter de a transforma celulele vegetale, bacteria este acum utilizată activ pentru a introduce material genetic în scopul modificării genetice a plantelor [32] [33] . R. radiobacter este capabil să transforme atât plante dicotiledone [34] [35] cât și unele plante monocotiledone [36] [37] și unele ciuperci microscopice [38] . Prin urmare, au fost dezvoltați vectori speciali bazați pe plasmida Ti cu fitohormon șters și gene opine („plasmidă dezarmată”) pentru a introduce informații genetice străine în genomul plantei [39] pentru a obține plante cu trăsăturile benefice dorite.