Corpul lui Barr

Corpul Barr (cromatina X-sex) este un cromozom X inactiv  pliat într-o structură densă ( heterocromatică ) , observată în nucleii de interfază ai celulelor somatice ale mamiferelor placentare feminine , inclusiv a oamenilor. Se colorează bine cu coloranți de bază [1] .

Oricare dintre cei doi cromozomi X din genom poate fi inactivat la începutul dezvoltării embrionare ; alegerea se face aleatoriu. O excepție la șoarece o constituie celulele membranelor germinale , formate tot din țesutul embrionului, în care doar cromozomul X patern este inactivat [2] .

Astfel, la o femelă de mamifer care este heterozigotă pentru orice trăsătură determinată de gena cromozomului X, diferite alele ale acestei gene lucrează în celule diferite ( mozaicism ). Un exemplu clasic vizibil de astfel de mozaicism este colorarea pisicilor din coajă de țestoasă  - în jumătate din celule este activ cromozomul X cu "roșu" și în cealaltă jumătate - cu alela "neagră" a genei implicate în formarea melanina . Pisicile din carapace testoasa sunt extrem de rare si au doi cromozomi X ( aneuploidie ) [3] .

La oamenii și animalele cu aneuploidie care au 3 sau mai mulți cromozomi X în genom (vezi, de exemplu, sindromul Klinefelter ), numărul de corpi Barr din nucleul unei celule somatice este cu unul mai mic decât numărul de cromozomi X ( adică doar 1 rămâne întotdeauna cromozomul X activ, indiferent câți sunt).

Utilizare

Analiza cromatinei sexuale este utilizată pentru:

1. Analiza prin celule a unui individ de sexul său, atunci când acesta nu este disponibil pentru cercetare (diagnostic prenatal al sexului fătului, examen medico-legal etc.).
2. Identificarea sexului dacă nu este clar (de exemplu, la determinarea hermafroditismului adevărat sau fals).
3. Verificarea corespondenței fenotipului cu genotipul organismului (de exemplu, la examinarea femeilor la competiții sportive).
4. Determinarea sexului fătului în uter, atunci când există suspiciunea unei boli legate de sex (de exemplu, hemofilie, unele forme de distrofie musculară etc.), pentru a preveni nașterea unui copil bolnav în stadiu terminal.
5. Este utilizat pentru diagnosticarea preliminară a abaterilor în numărul sau structura cromozomilor sexuali, atunci când subiectul are încălcări ale dezvoltării sexuale.

Progrese în obținerea cromatinei sexuale pentru analiză

1. Obținerea de material celular. Surse - o varietate de țesuturi, dar sunt preferate cele care nu trebuie cultivate in vitro (in vitro).
2. Pentru a determina cromatina X la un adult, frotiurile din mucoasa bucală sunt cel mai des utilizate , mai rar din mucoasa vaginală, precum și celulele foliculilor de păr. Diagnosticul perinatal se realizează cu ajutorul celulelor amniotice.
3. Pentru a determina numărul de cromatinei Y, se folosesc țesuturile de mai sus, precum și spermatozoizi, precum și limfocite cultivate.
4. În general, culturile celulare cu un singur strat, de obicei fibroblaste, sunt ideale pentru analiza cromatinei X și cromatinei Y.
5. Fixarea preparatelor cu o soluție de metanol sau un amestec de etanol și acid acetic (3:1) sau etanol singur.
6. Deshidratarea prin transfer (NUMAI pentru analiza corpurilor Barr) a medicamentului dintr-o soluție în alta cu expunere la fiecare timp de 5 minute: în alcool 70 °, în alcool 50 °, în apă distilată I, în apă distilată II.
7. Hidroliza (NUMAI pentru analiza corpului Barr) în HCI (opțional).
8. Colorarea cu cromatina sexuală. Metodele de colorare a cromatinei X și Y sunt diferite. Primul tip de cromatina se colorează cu preparate pe bază de coloranți nefluorescenți: fucsin bazic, tionină, acetoorceină, albastru de toluidină etc. Al doilea tip este colorat cu fluorocromi - derivați ai acridinei portocalii: chinină, muștar quinacrin, propil quinacrin. Preparatele sunt maturate în vopsea de la 30 de minute la 12 ore.

Preparatele de cromatină X sunt uscate și examinate prin imersie în ulei în lumină transmisă. Preparatele de Y-cromatină sunt incluse într-o soluție tampon specială și studiate în lumină ultravioletă folosind un microscop luminiscent.

Analiză

Testul se efectuează pe celule dezarticulate, cu vultur răspândit. Secțiunile de țesut pentru determinarea cromatinei sexuale sunt utilizate numai atunci când este imposibil să se obțină frotiuri sau preparate-amprente ale unei secțiuni de organ.

1. Microscopie.
2. Interpretarea rezultatelor [4] .

Surse

1. ↑ Dicţionar enciclopedic biologic. M., „Enciclopedia Sovietică”, 1986.
2. ↑ M. Singer, P. Berg. Gene și genoame. M., „Mir”, 1998. T. 2, S. 146.
3. ↑ Mozaicism, broaște țestoase și pisoi imposibil genetic Arhivat 21 octombrie 2009 la Wayback Machine .
4. ↑ Marea Enciclopedie Medicală / Ed. UN. Bakulev: în 35 vol. - M .: Medgiz, 1956. -1964. – 1151 p.