Aloficocianina (din greacă : ἄλλος (allos) - „altul”, φύκος (phycos) - „alge”, și κυανός (kyanos) - „albastru”) este o proteină de recoltare a luminii din familia ficobiliproteinelor , care include și ficocianina , ficoeritrina . și ficoeritrocianina și este un pigment auxiliar pentru clorofilă . Toate ficobiliproteinele sunt solubile în apă și, prin urmare, nu pot fi ancorate la membrană ca carotenoidele , ci formează grupuri ancorate la membrană numite ficobilizomi . Aloficocianina absoarbe și emite lumină roșie (650, respectiv 660 nm) și este ușor de detectat în cianobacterii și algele roșii . Capacitatea ficobilinelor de a emite lumină este utilizată în trusele de imunotestare. Aloficocianina este adesea folosită în citometria în flux , în numărarea și sortarea celulelor și în microscopie . Pentru a face acest lucru, se introduce reticulare chimică în el.
Aloficocianina poate fi izolată din diferite tipuri de alge roșii sau albastre-verzi, fiecare dintre acestea sintetizând propria formă, ușor diferită, a acestei molecule. Proteina constă din două tipuri de subunități (α și β), fiecare purtând un grup cromofor de ficocianobilină . Formula generală a unei proteine poate fi descrisă ca (αβ) 3 . Greutatea moleculară a aloficocianinei este de 105 kDa.
| Absorbție maximă | 652 nm |
| Absorbție suplimentară maximă | 625 nm |
| Radiația maximă | 657,5 nm |
| Stokes schimbă | 5,5 nm |
| coeficientul de extincție | 2,4 x 105 M −1 cm −1 |
| ieșire cuantică | 0,68 |
| Luminozitate | 1,6 x 10 5 M −1 cm −1 |
Aloficocianina reticulata
După cum sa menționat mai sus, pentru a utiliza aloficocianina într-un imunotest, aceasta trebuie să fie reticulat chimic pentru a preveni disocierea subunităților sale, care apare destul de des în tampoanele fiziologice standard. [1] Metoda tradițională pentru aceasta este amestecarea cu 1-etil-3,3-dimetilaminopropil, un agent puternic de reticulare. Apoi este tratat cu o soluție de opt molare de uree și apoi lăsat să se renatureze, dar deja într-un tampon fiziologic. Această procedură vă permite să scăpați de subunitățile nereticulate. [2] Există metode alternative, a căror utilizare vă permite să salvați structura nativă a trimerului și să obțineți un produs final mai luminos [3] .