Virusul hepatitei A

Versiunea actuală a paginii nu a fost încă revizuită de colaboratori experimentați și poate diferi semnificativ de versiunea revizuită la 23 martie 2017; verificările necesită 22 de modificări .
Virusul hepatitei A
clasificare stiintifica
Grup:Viruși [1]Tărâm:RiboviriaRegatul:OrthornaviraeTip de:PisuviricotaClasă:PisoniviricetesOrdin:PicornaviralesFamilie:picornavirusuriGen:HepatovirusuriVedere:Virusul hepatitei A
Denumire științifică internațională
Hepatovirusul A
Sinonime
  • Virusul hepatitei A
  • virusul hepatitei umane A
  • Virusul hepatitei A simian
Grupul Baltimore
IV: virusuri (+)ssRNA

Virusul hepatitei A [2] ( Eng.  Hepatovirus A , HAV) este un tip de virus din genul Hepatovirus din familia Picornaviridae . Nu are înveliș și conține un ARN monocatenar (+) ambalat într-o capsidă proteică [3] . Oamenii și alte vertebrate servesc drept gazde naturale [4] [5] .

În 1991, în genul Hepatovirus au fost izolate două picornavirusuri ( virusul hepatitei umane A și virusul hepatitei simiane A ) care provoacă hepatita A la oameni și, respectiv, la maimuțe . Studii detaliate au arătat că ambele soiuri, printre care au fost identificate mai multe genotipuri virale , aparțin aceluiași serotip viral [7] . În 2014, denumirea speciei a fost schimbată, la fel ca și pentru alte câteva specii de picornavirusuri [8] .

În 2015 a fost stabilită originea virusului hepatitei A: este de origine animală. A apărut în urmă cu aproximativ 25 de milioane de ani, când familia marilor maimuțe s-a separat de familia marmoset [9] . Virusul encefalomielitei aviare este cel mai apropiat genetic de Hepatovirusul A [10] [11] .

Virusul hepatitei A are un loc slab de aterizare intern al ribozomului ( IRES ) [12] .  Regiunea genomului care codifică capsida virusului conține grupuri conservate de codoni care limitează variabilitatea antigenică [13] .

Structura

Hepatovirusul A este un picornavirus ; este neînvelit și conține ARN monocatenar (+), ambalat într-un înveliș proteic [14] . S- a găsit un singur serotip al virusului, dar există mai multe genotipuri [15] . Utilizarea codonilor în genom este părtinitoare și neobișnuit de diferită de gazda sa. În regiunea care codifică capsidul HAV, grupurile foarte conservate de codoni rari limitează variația antigenică [4] [16] .

Genotipuri

Au fost descrise un serotip și șapte grupuri genetice diferite (patru oameni și trei simieni) [14] . Genotipurile umane sunt numerotate I-III. Au fost descrise șase subtipuri (IA, IB, IIA, IIB, IIIA, IIIB). Genotipurile de maimuță au fost numerotate IV-VI. Un singur izolat uman de genotip VII a fost de asemenea descris [17] . Genotipul III a fost izolat atât de la oameni, cât și de la maimuțe bufniță. Majoritatea izolatelor umane sunt de genotip I [18] . Dintre izolatele de tip I, subtipul IA reprezintă majoritatea.

Frecvența mutațiilor în genom este estimată la 1,73-9,76 × 10-4 modificări de nucleotide per situs pe an [19] [20] Tulpinile umane par să fi evoluat din tulpini simiene în urmă cu aproximativ 3600 de ani [20] .Media vârsta tulpinilor genotipurilor III și IIIA este estimată la 592, respectiv 202 ani [20] .

Ciclul de reproducere

Vertebratele precum oamenii servesc ca gazde naturale. Căile de transmitere sunt fecal-oral și sânge [4] .

După ingerare, HAV intră în fluxul sanguin prin epiteliul orofaringian sau intestinal . Sângele transportă virusul la ținta sa, ficatul, unde se reproduce în hepatocite și celule Kupffer (macrofage hepatice). Replicarea virusului are loc citoplasmatic . Intrarea în celula gazdă se realizează prin atașarea virusului la receptorii gazdă, care mediază endocitoza . Replicarea urmează modelul de replicare a virusului ARN cu catenă pozitivă. Transmiterea are loc prin inițiere virală. Virusul iese din celula gazdă prin liză și eliberare de viroporine. Virionii sunt excretați în bilă și fecale . HAV este eliminată în cantități mari cu aproximativ 11 zile înainte de apariția simptomelor sau a anticorpilor IgM anti -HAV în sânge. Perioada de incubație este de 15-50 de zile, iar riscul de deces la cei infectați este mai mic de 0,5%.

În hepatocitele hepatice, genomul ARN este eliberat din învelișul proteic și tradus de ribozomii celulei proprii. Spre deosebire de alte picornavirusuri, acest virus necesită un factor de inițiere eucariotic intact 4G (eIF4G) pentru a iniția translația.Cerința pentru acest factor are ca rezultat incapacitatea de a opri sinteza proteinelor gazdă, spre deosebire de alte picornavirusuri. În acest caz, virusul trebuie să concureze ineficient pentru mecanismul de translație celulară, ceea ce poate explica creșterea sa slabă în cultura celulară . Probabil din acest motiv, virusul a adoptat strategic o utilizare a codonilor foarte optimizată în mod natural în raport cu gazda sa celulară. Cum funcționează exact această strategie nu este complet clar.

Nu se observă nicio citotoxicitate aparentă mediată de virus, probabil datorită cerinței virusului pentru eIF4G intact, iar patologia hepatică este probabil mediată de imunitate .

Gen Maestru tropism tisular Intrarea în corp Ieși din cușcă Site de replicare Locul de asamblare Difuzare
Hepatovirus oameni, vertebrate Ficat Endocitoza receptorilor celulari Liza Citoplasma Citoplasma Oral-fecale, sânge

Transmisie

Virusul este răspândit pe cale fecal-orală, iar infecția apare adesea în condiții de salubritate proastă și supraaglomerare. Hepatita A se poate transmite parenteral, dar foarte rar prin sânge și produse din sânge. Focarele de origine alimentară sunt frecvente [21] și consumul de crustacee cultivate în apă contaminată este asociată cu un risc ridicat de infecție [22] . Aproximativ 40% din toate hepatitele virale acute sunt cauzate de HAV [23] . Persoanele infectate sunt contagioase până la apariția simptomelor, la aproximativ 10 zile după infectare. Virusul este rezistent la detergenți, acizi (pH 1), solvenți (ex. eter, cloroform), uscare și temperaturi de până la 60 °C. Poate supraviețui luni de zile în apă dulce și sărată. Focarele tipice provin din surse generale (de exemplu, apă, restaurant). Infecția este frecventă în rândul copiilor din țările în curs de dezvoltare , ajungând la 100% din cazuri, dar imunitatea pe viață apare după infecție. HAV poate fi inactivat prin tratament cu clor (apă de băut), formol (0,35%, 37°C, 72 ore), acid peracetic (2%, 4 ore), beta-propiolactonă (0,25%, 1 oră) și radiații ultraviolete. (2 μW/ cm2 /min). Virusul hepatitei A se poate transmite și pe cale sexuală, în special prin actul sexual oroanal.

În țările în curs de dezvoltare și regiunile cu standarde scăzute de igienă, ratele de infectare cu acest virus sunt mari [24] și boala se transmite de obicei în copilăria timpurie. Pe măsură ce veniturile cresc și accesul la apă curată se extinde, incidența HAV este în scădere [25] . Cu toate acestea, în țările dezvoltate, infecția apare în principal la tinerii susceptibili, cei mai mulți dintre aceștia dobândind virusul în timp ce călătoresc în țări cu incidență mare [26] sau prin contactul cu persoane infectate.

Oamenii sunt singurul rezervor natural al virusului. Nicio insectă cunoscută sau alți vectori animale nu poate transmite virusul. Nu a fost raportată nicio afecțiune cronică cu HAV [27] .

Rezistență

Virusul este relativ rezistent la temperaturi ridicate, acizi, solvenți grăsimi (fără lipide), dezinfectanți și tolerează bine temperaturile scăzute. Toate acestea contribuie la conservarea sa pe termen lung în mediul extern. La temperatura camerei, supraviețuiește câteva săptămâni, la 60 ° C își pierde parțial infecțiozitatea după 4-12 ore, complet după câteva minute la 85 ° C. Este foarte rezistent la clor, datorită căruia este capabil să pătrundă în apa de la robinet prin barierele stațiilor de tratare a apei. [28]

Epidemiologie

Virusul hepatitei A este foarte patogen pentru oameni. Potrivit OMS (1987), infecția cu un singur virion este suficientă pentru apariția bolii. Cu toate acestea, doza practică infecțioasă este probabil mult mai mare. Sursa de infecție este doar o persoană infectată. Virusul este excretat în cantități mari cu fecale cu 12-14 zile înainte de apariția icterului și în decurs de 3 săptămâni. perioada icterică. Nu au existat diferențe semnificative în izolarea agentului patogen la pacienții cu forme icterice, anicterice și asimptomatice de hepatită A. Metoda de infecție este fecal-oral , în principal apă, precum și de uz casnic și alimentar. [28]

Prevenirea

Hepatita A poate fi prevenită prin vaccinare , o bună igienă și salubritate [29] [30] .

Două tipuri de vaccinuri conțin fie hepatovirus A inactivat, fie virus viu, dar atenuat [31] . Ambele asigură imunitate activă împotriva infecțiilor viitoare. Vaccinul protejează împotriva VHA în mai mult de 95% din cazuri pentru mai mult de 25 de ani [32] . În Statele Unite, vaccinul dezvoltat de Maurice Hilleman și echipa sa a fost autorizat în 1995 [33] [34] , iar vaccinul a fost utilizat pentru prima dată în 1996 pentru copiii din zonele cu risc ridicat, iar în 1999 a fost extins la zone de risc.nivel de infecție [35] .

Vaccinul se administrează prin injecție. Doza inițială asigură protecție pe o perioadă de un an, începând cu 2-4 săptămâni de la vaccinare; o a doua doză de rapel administrată la șase până la 12 luni mai târziu oferă protecție pentru mai mult de 20 de ani [35] .

Vaccinul a fost introdus în 1992 și a fost recomandat inițial celor cu risc crescut. De atunci, Bahrain și Israel s-au angajat în programe de eradicare [36] . Australia, China, Belarus, Italia, Spania și Statele Unite au demarat programe similare. Incidența hepatitei A în zonele în care vaccinarea este practicată pe scară largă a scăzut brusc. În China și Statele Unite, incidența hepatitei A a scăzut cu 90% din 1990 [37] [38] .

În Statele Unite, vaccinarea copiilor este recomandată la vârsta de 1 și 2 ani [39] ; Vaccinarea împotriva hepatitei A nu este recomandată persoanelor sub 12 luni [40] . De asemenea, este recomandat celor care nu au fost imunizați anterior și care au fost sau pot fi expuși din cauza călătoriilor [39] . CDC recomandă vaccinarea împotriva infecției pentru bărbații care fac sex cu bărbați [41] .

Patogeneza, clinica

Perioada de incubație variază de la 15 la 50 de zile, în funcție de mărimea dozei infectante a virusului, dar este în medie de 28-30 de zile. Odată ajuns în organism, virusul hepatitei A se înmulțește în ganglionii limfatici regionali, pătrunde în sânge și apoi în celulele hepatice și provoacă hepatită acută difuză, care este însoțită de leziuni ale hepatocitelor și elementelor reticuloendoteliale ale ficatului și scăderea funcțiile sale de detoxifiere și barieră. Liza hepatocitelor este mediată de un răspuns imun la infecție cu participarea limfocitelor T citotoxice și/sau mecanismul de citotoxicitate mediată celular dependent de anticorpi. Se presupune că HAV nu are citopatogenitate directă semnificativă.

Cel mai tipic tablou al hepatitei A este o formă icterică acută ciclică: perioada de incubație, perioada prodromală (preicterică), perioada icterică și convalescența. Cu toate acestea, în focarele de infecție sunt detectați un număr mare de pacienți cu forme de infecție anicterice și asimptomatice, numărul cărora predomină semnificativ asupra ictericii („fenomenul iceberg”) [28] .

Imunitatea postinfecțioasă

Imunitatea post-infecțioasă este puternică și de lungă durată, datorită anticorpilor care neutralizează virusul și celulelor memoriei imune.

Tratament

Nu există un tratament specific pentru hepatita A. Recuperarea după simptome după infecție poate dura săptămâni sau luni [42] . Datorită faptului că producția de interferoni este afectată în hepatitele virale, pentru tratamentul hepatitei, inclusiv hepatitei A, se utilizează interferon și un inductor al sintezei sale endogene , amixina [28] . Vaccinul cu virusul hepatitic A a fost eficient în limitarea focarelor din întreaga lume [43] .

Vezi și

Note

  1. ↑ Taxonomia Virușilor  pe site-ul web al Comitetului Internațional pentru Taxonomia Virușilor (ICTV) .
  2. ↑ Atlas de Microbiologie Medicală, Virologie și Imunologie / Ed. A. A. Vorobieva, A. S. Bykova. - M . : Agenţia de Informaţii Medicale, 2003. - S.  119 . — ISBN 5-89481-136-8 .
  3. ↑ Cristina J., Costa-Mattioli M. Variabilitatea genetică și evoluția moleculară a virusului hepatitei A  //  Virus Res. : jurnal. - 2007. - august ( vol. 127 , nr. 2 ). - P. 151-157 . - doi : 10.1016/j.virusres.2007.01.005 . — PMID 17328982 .
  4. ↑ 123 Zona virală . _ ExPASy. Consultat la 15 iunie 2015. Arhivat din original pe 17 iunie 2015.
  5. ↑ ICTV Virus Taxonomy: 2014 Release . Consultat la 15 iunie 2015. Arhivat din original la 10 iulie 2015.
  6. ↑ Francki RIB, Fauquet CM, Knudson DL & Brown F. (eds). Clasificarea și nomenclatura virusurilor. Al cincilea raport al Comitetului Internațional pentru Taxonomia Virușilor  : [ ing. ] . — Raportul ICTV al 5-leaICTV. - Archives of Virology Supplementum 2, 1991. - P. 673.
  7. ↑ Costa-Mattioli M., Di Napoli A., Ferré V., Billaudel S., Perez-Bercoff R., Cristina J. Genetic variability of hepatitis A virus  //  Journal of General Virology. — Societatea de microbiologie, 2003. — Decembrie ( vol. 84 , nr. Pt 12 ). - P. 3191-3201 . doi : 10.1099/ vir.0.19532-0 . — PMID 14645901 .  (link indisponibil)
  8. ↑ Knowles, Nick. Redenumiți 12 specii de picornavirus  : [ ing. ] // ICTVonline. — Cod atribuit: 2014.016aV. - 2014. - 3 p.
  9. ↑ Știința și tehnologia Rusiei - Virusul hepatitei umane A este de origine animală . Consultat la 10 noiembrie 2015. Arhivat din original la 25 martie 2016.
  10. ↑ Bakhshesh M. , Groppelli E. , Willcocks MM , Royall E. , Belsham GJ , Roberts LO Virusul picornavirus al encefalomielitei aviare posedă un element intern de intrare în ribozom asemănător virusului hepatitei C.  (engleză)  // Jurnal de virologie. - 2008. - Vol. 82, nr. 4 . - P. 1993-2003. - doi : 10.1128/JVI.01957-07 . — PMID 18077729 .
  11. ↑ Marvil P. , Knowles NJ , Mockett AP , Britton P. , Brown TD , Cavanagh D. Virusul encefalomielitei aviare este un picornavirus și este cel mai strâns legat de virusul hepatitei A.  (engleză)  // Jurnalul de virologie generală. - 1999. - Vol. 80 (Pt 3). - P. 653-662. — PMID 10092005 .
  12. ↑ Whetter LE, Day SP, Elroystein O., Brown EA, Lemon SM (1994). Eficiență scăzută a regiunii 5’ netraduse a ARN-ului virusului hepatitei A în direcționarea translației independente de capac în celulele de rinichi permisive de maimuță. J Virol 68 : 5253-5263.
  13. ↑ Aragones L., Bosch A., Pinto RM (2008). Spectrele mutante ale virusului hepatitei A sub presiunea selectivă a anticorpilor monoclonali: constrângerile de utilizare a codonilor limitează variabilitatea capsidei. J Virol 82 : 1688-1700.
  14. ↑ 1 2 Cristina J, Costa-Mattioli M (august 2007). „Variabilitatea genetică și evoluția moleculară a virusului hepatitei A”. VirusRes . 127 (2): 151-7. DOI : 10.1016/j.virusres.2007.01.005 . PMID  17328982 .
  15. ↑ Costa-Mattioli M, Di Napoli A, Ferré V, Billaudel S, Perez-Bercoff R, Cristina J (decembrie 2003). „Variabilitatea genetică a virusului hepatitei A”. J. Gen. Virol . 84 (Pt 12): 3191-201. DOI : 10.1099/vir.0.19532-0 . PMID  14645901 .
  16. ↑ Aragonès L, Bosch A, Pintó RM (februarie 2008). „Spectrele mutante ale virusului hepatitei A sub presiunea selectivă a anticorpilor monoclonali: constrângerile de utilizare a codonilor limitează variabilitatea capsidei” . J. Virol . 82 (4): 1688-700. DOI : 10.1128/JVI.01842-07 . PMC2258700  . _ PMID  18057242 .
  17. ↑ Ching KZ, Nakano T, Chapman LE, Demby A, Robertson BH (ianuarie 2002). „Caracterizarea genetică a virusului hepatitei A de genotip VII de tip sălbatic”. J. Gen. Virol . 83 (Pt 1): 53-60. DOI : 10.1099/0022-1317-83-1-53 . PMID  11752700 .
  18. ↑ de Paula VS, Baptista ML, Lampe E, Niel C, Gaspar AM (ianuarie 2002). „Caracterizarea virusului hepatitei A izolate din subgenotipurile IA și IB din Rio de Janeiro, Brazilia.” J. Med. Virol . 66 (1):22-7. DOI : 10.1002/jmv.2106 . PMID  11748654 . S2CID  42775132 .
  19. ↑ Moratorio G, Costa-Mattioli M, Piovani R, Romero H, Musto H, Cristina J (noiembrie 2007). „Inferența coalescentă bayesiană a populațiilor cu virusul hepatitei A: rate și modele evolutive”. J. Gen. Virol . 88 (Pt 11): 3039-42. DOI : 10.1099/vir.0.83038-0 . PMID  17947528 .
  20. ↑ 1 2 3 Kulkarni MA, Walimbe AM, Cherian S, Arankalle VA (decembrie 2009). „Genomurile de lungime completă ale tulpinilor de virus hepatitei A de genotip IIIA (1995–2008) din India și estimări ale ratelor și vârstelor evolutive.” Infecta. Genet. Evol . 9 (6): 1287-94. DOI : 10.1016/j.meegid.2009.08.009 . PMID  19723592 .
  21. ↑ Brundage SC, Fitzpatrick AN (2006). Hepatita A. Sunt un medic de familie . 73 (12): 2162-8. PMID  16848078 . Arhivat din original pe 09.03.2014. Parametrul depreciat folosit |url-status=( ajutor )
  22. ↑ Lees D (2000). „Viruși și crustacee bivalve”. Int. J. Microbiol alimentar . 59 (1-2): 81-116. DOI : 10.1016/S0168-1605(00)00248-8 . PMID  10946842 .
  23. ↑ Murray, PR, Rosenthal, KS și Pfaller, MA (2005). Microbiologie medicală a 5-a ed., Elsevier Mosby.
  24. ↑ Steffen R (octombrie 2005). „Schimbarea epidemiologiei globale legate de călătorii a hepatitei A”. A.m. J. Med . 118 (Supliment 10A): 46S-49S. DOI : 10.1016/j.amjmed.2005.07.016 . PMID  16271541 .
  25. ↑ Jacobsen KH, Koopman JS (2005). „Efectele dezvoltării socioeconomice asupra modelelor de seroprevalență a virusului hepatitei A la nivel mondial”. Int J Epidemiol . 34 (3): 600-9. doi : 10.1093/ ije /dyi062 . PMID  15831565 .
  26. ↑ Connor B.A. (2005). „Vaccinul împotriva hepatitei A la călătorul de ultimă oră.” A.m. J. Med . 118 (Supliment 10A): 58S-62S. DOI : 10.1016/j.amjmed.2005.07.018 . PMID  16271543 .
  27. ↑ Hepatita A. Centre pentru Controlul și Prevenirea Bolilor. Centers for Disease Control and Prevention, 2015. Web. 25 oct 2016.
  28. ↑ 1 2 3 4 Korotyaev A. I. , Babichev S. A. Microbiologie medicală, imunologie și virologie. - Sankt Petersburg. : SpecLit, 2010. - S. 1062-1064. - 1992 p. - ISBN 978-5-299-00425-0 .
  29. ↑ Ryan KJ, Ray CG (editori). Sherris Microbiologie Medicală. — al 4-lea. - McGraw Hill, 2004. - P. 541-4. - ISBN 978-0-8385-8529-0 .
  30. ↑ Hepatita A - Prevenirea . Opțiuni NHS . Serviciul Național de Sănătate (Anglia) (21 martie 2012). Arhivat din original pe 22 februarie 2009.
  31. ↑ Irving GJ, Holden J, Yang R, Pope D (2012). „Imunizarea împotriva hepatitei A la persoanele care nu au fost expuse anterior la hepatita A.” . Cochrane Database Syst Rev. 7 (7): CD009051. DOI : 10.1002/14651858.CD009051.pub2 . PMC  6823267 . PMID22786522  . _
  32. ↑ Nothdurft HD (iulie 2008). Vaccinurile împotriva hepatitei A. Expert Rev Vaccinuri . 7 (5): 535-45. DOI : 10.1586/14760584.7.5.535 . PMID  18564009 . S2CID  22452932 .
  33. ↑ Hepatita A: Vaccin Licensed |  Istoria vaccinurilor . www.historyofvaccines.org . Preluat: 6 februarie 2021.
  34. ↑ Tulchinsky, Theodore H. (2018). „Maurice Hilleman: Creatorul de vaccinuri care au schimbat lumea” . Studii de caz în sănătatea publică : 443-470. DOI : 10.1016/B978-0-12-804571-8.00003-2 . ISBN  9780128045718 . PMC  7150172 .
  35. ↑ 1 2 Vaccinul împotriva hepatitei A: Ce trebuie să știți . Declarație de informații despre vaccin . CDC (21 martie 2006). Consultat la 12 martie 2007. Arhivat din original pe 20 noiembrie 2007.
  36. ↑ Andre F.E. (2006). „Vaccinarea universală în masă împotriva hepatitei A”. Curr Top Microbiol Immunol . Subiecte actuale în microbiologie și imunologie. 304 : 95-114. DOI : 10.1007/3-540-36583-4_6 . ISBN  978-3-540-29382-8 . PMID  16989266 .
  37. ↑ Cui F, Hadler SC, Zheng H, Wang F, Zhenhua W, Yuansheng H, Gong X, Chen Y, Liang X și colab. (2009). „Supravegherea hepatitei A și utilizarea vaccinurilor în China din 1990 până în 2007” . J Epidemiol . 19 (4): 189-195. doi : 10.2188 /jea.JE20080087 . PMC  3924108 . PMID  19561383 .
  38. ↑ Daniels D, Grytdal S, Wasley A (mai 2009). „Supravegherea hepatitei virale acute — Statele Unite, 2007” (PDF) . Suma de supraveghere MMWR . 58 (3): 1-27. PMID  19478727 . Arhivat din original (PDF) la 19.05.2012. Parametrul depreciat folosit |url-status=( ajutor )
  39. ↑ 1 2 Matheny, SC; Kingery, JE (1 decembrie 2012). Hepatita A. . Sunt un medic de familie . 86 (11): 1027-34, test 1010-1012. PMID  23198670 . Arhivat din original la 9 martie 2014. Parametrul depreciat folosit |url-status=( ajutor )
  40. ↑ Hepatita A Întrebări și răspunsuri pentru profesioniștii din domeniul sănătății | Divizia Hepatitei Virale | CDC  (engleză)  ? . www.cdc.gov (27 iulie 2018). Preluat: 15 august 2018.
  41. ↑ Bărbați care fac sex cu bărbați | Populații și setări | Divizia Hepatitei Virale | CDC  (engleză)  ? . www.cdc.gov (31 mai 2015). Preluat: 13 decembrie 2017.
  42. ↑ Hepatita A. Consultat la 20 februarie 2014. Arhivat din original pe 21 februarie 2014.
  43. ↑ Connor BA Vaccinul împotriva hepatitei A în călătorul de ultimă oră.  (Engleză)  // Jurnalul American de Medicină. - 2005. - Octombrie ( vol. 118 Suppl 10A ). - P. 58-62 . - doi : 10.1016/j.amjmed.2005.07.018 . — PMID 16271543 .