Rafturile lipidice sunt regiuni speciale (microdomenii) ale membranei plasmatice îmbogățite în glicosfingolipide și colesterol [1] [2] [3] [4] [5] . Aceste site-uri coordonează procesele celulare , afectează fluiditatea membranei , servesc ca centre de organizare pentru asamblarea moleculelor de semnalizare , reglează mișcarea proteinelor membranare , a receptorilor și, de asemenea, reglează neurotransmisia [5] [6] . Plutele lipidice sunt mai structurate și mai dense decât stratul lipidic înconjurător ; în același timp, se pot deplasa liber în ea [7] .
Până în 1982, s-a crezut pe scară largă că fosfolipidele și proteinele membranei erau distribuite aleatoriu în membrana celulară - în conformitate cu modelul mozaic structurii membranei celulare, propus în 1972 de S. J. Singer și G. Nicholson. [6] [8] . Modelul a presupus că proteinele membranei „înoată” într-o mare lipidică omogenă [9] .
Cu toate acestea, în anii 1970, A. Stir și E. Zakman, precum și M. J. Karnovsky și colegii, folosind metode fizice , au dovedit existența unor microdomenii membranare speciale [10] [11] . Existența acestor microdomenii a fost explicată prin proprietățile fizice și organizarea amestecurilor de lipide [12] . În 1974, observarea efectului temperaturii asupra comportamentului membranei a sugerat existența „grupurilor de lipide” în membrane, iar în 1975 s-a descoperit că aceste clustere pot reprezenta regiuni „cvasi-cristaline” situate în regiunile lipidice mai lichide. În 1978, studiile care utilizează împrăștierea cu raze X au dat un nou impuls dezvoltării ideii de „clustere” și au făcut posibilă definirea microdomeniilor ca „lipide într-o stare mai ordonată”. În 1982, Karnovsky și colaboratorii au formulat conceptul de domenii lipidice din membrană. Studiile lor au stabilit eterogenitatea în durata de viață a fluorescenței a moleculelor de 1,6-difenil-1,3,5-hexatrienă , ceea ce indică prezența mai multor faze lipidice în membrană [6] . Un tip de astfel de microdomenii este format din colesterol și sfingolipide . Ele se formează ca urmare a izolării acestor lipide într-o fază separată, ceea ce a fost demonstrat experimental [13] . De asemenea, s-a constatat că astfel de microdomenii („plută”) sunt prezente și în membranele celulare [14] .
Ca urmare, s-a format treptat un nou concept al structurii membranei celulare, reflectând restructurarea dinamică cu formarea de clustere moleculare de nivel înalt [9] . Termenul „plute lipidice” a fost propus pentru prima dată în 1988 de C. Simons și G. van Meer [15] . Ei au aplicat termenul ( eng. lipid raft „lipid raft”) zonelor de lipide dens împachetate plutind pe suprafața unui fosfolipide mai fluid [9] . Inițial, conceptul de plute a fost folosit pentru a explica transportul colesterolului de la aparatul trans Golgi la membrana plasmatică. Această idee a fost introdusă pentru prima dată de Simons și E. Ikonen în 1997 [16] . În 2006, la Keystone Symposium of Lipid Rafts and Cell Function , plutele lipidice au fost definite ca „domenii mici (10–200 nm), eterogene, foarte dinamice, îmbogățite în steroli și sfingolipide care compartimentează procesele celulare. Plutele mici se pot combina uneori în altele mai mari prin interacțiuni proteine-proteine.” Recent, au fost publicate multe lucrări controversate referitoare la plutele lipidice; dimensiunea și timpul de existență a plutelor lipidice pot fi atribuite numărului de puncte controversate (pentru mai multe detalii , vezi Dispute în jurul plutelor lipidice ).
Până în prezent, următoarele întrebări despre plutele lipidice rămân fără răspuns [6] :
Una dintre principalele diferențe dintre plutele lipidice și membrana plasmatică este compoziția lor lipidică. Studiile au arătat că plutele lipidice conțin de 3-5 ori mai mult colesterol decât stratul dublu lipidic din jur [17] . În plus, plutele lipidice sunt îmbogățite în sfingolipide - de exemplu, sfingomielină , al cărei conținut în plutele lipidice este de obicei cu 50% mai mare decât cel din membrana plasmatică. Practic nu există glicerofosfolipide în plute [2] . Pentru a compensa conținutul crescut de sfingomielină, proporția de fosfatidilcolină în plutele lipidice este redusă, drept urmare procentul de lipide care conțin colină în ele este, de asemenea, cu aproape 50% mai mic în comparație cu membrana înconjurătoare. Colesterolul interacționează de preferință cu sfingolipidele (deși nu numai cu acestea), datorită structurii lor și gradului de saturație al lanțurilor lor hidrocarburice . Deși nu toate fosfolipidele din plută sunt complet saturate, grupările lor acil hidrofobe sunt mai saturate și mai dense decât cele din lipidele bistraturi din jur [6] .
Colesterolul servește ca un „clei” dinamic care ține lipidele plutei împreună [5] și umple toate golurile dintre ele. Datorită naturii rigide a grupului de steroli, colesterolul se află de preferință în plute, unde cozile lungi și saturate de acil sfingolipide pot forma legături mai strânse și mai puternice la sistemul său inelar decât cozile fosfolipide mai scurte și adesea nesaturate ale stratului dublu din jur. Din acest motiv, plutele lipidice sunt mai puțin fluide decât restul stratului dublu [2] .
Unii cercetători atribuie aspectul plutelor în membranele model separării membranei în faze lichide ordonate (faza Lo) și dezordonate (fază Ld sau Lα) [18] . Motivele acestei separări în faze sunt neclare, dar nemiscibilitatea lor minimizează aparent energia liberă a acestor două faze. S-a demonstrat că plutele lipidice și membrana înconjurătoare au grosimi diferite datorită faptului că lanțurile de hidrocarburi din sfingolipide sunt mai lungi și mai drepte decât în alte lipide membranare [1] . Acest lucru duce la faptul că straturile hidrofobe ale plutelor și restul stratului dublu nu se unesc între ele la limita a două faze. S-a descoperit că această diferență de grosime crește tensiunea superficială la interfața dintre cele două faze, rezultând plute mai mari cu limite rotunjite și, prin urmare, minimizează costul energetic al menținerii plutelor ca faze separate. Alte evenimente spontane, cum ar fi îndoirea membranei sau îmbinarea plutelor mici în altele mai mari, pot, de asemenea, să minimizeze tensiunea la limita de fază [6] .
Datorită structurii și rezistenței lor la detergenții neionici [2] , cum ar fi Triton X-100 sau Brij-98, plutele lipidice sunt, de asemenea, numite complexe îmbogățite cu glicolipide insolubile în detergent ( GEM ) sau DIG ) [19] sau membrane rezistente la detergent (DRM-uri) ) . Această proprietate a plutelor lipidice poate fi utilizată pentru a estima fracția de suprafață celulară ocupată de plute din fracția care este rezistentă la solubilizarea detergentului . În unele cazuri poate fi de 50%. Măsurătorile indirecte ale dimensiunii plutelor fac posibilă estimarea aproximativă a diametrului unei plute la 50 nm [20] (cu toate acestea, există și alte opinii în acest sens, a se vedea Dispute în jurul plutelor lipidice ).
Plutele lipidice sunt extrem de bogate în proteine membranare integrale de două clase: una este ancorată în membrană de doi acizi grași saturati cu lanț lung (două grupe palmitoil sau palmitoil și miristoil ) legați covalent de aceste proteine , iar celălalt de un glicozilfosfatidilinozitol (GPI). -) ancoră. Există un schimb constant între proteinele plutei și restul stratului dublu: proteinele membranare pot intra și ieși din plute în câteva secunde . Trebuie remarcat faptul că pentru un proces în care două proteine membranare interacționează, prezența lor simultană în aceeași plută crește foarte mult probabilitatea ciocnirii lor. Prin urmare, unii receptori de membrană și proteinele de semnalizare se separă împreună precis în plutele membranare, iar transmiterea semnalului prin aceste proteine poate fi întreruptă prin manipulări care îndepărtează colesterolul din membrană și distrug plutele; astfel, plutele lipidice sunt implicate în multe căi de semnalizare celulară [20] .
Au fost propuse două tipuri de plute lipidice: planare (cunoscute și sub denumirea de plute non- caveolare sau glicolipide ) și plute lipidice caveolare . Plutele lipidice plane se află în planul membranei plasmatice (nu formează invaginări) și nu au trăsături morfologice distinctive. Plutele caveolare, dimpotrivă, formează proeminențe în formă de balon în membrana plasmatică care conține proteina caveolină , care face parte din depresiunile speciale ale membranei - caveolele ; cele mai observate plute sunt de acest tip. Caveolinele sunt foarte exprimate în creier , microvasele sistemului nervos , celulele endoteliale , astrocite , oligodendrocite , celule Schwann , ganglioni spinali și neuroni hipocampali . Plutele planare conțin proteina flotilină și se găsesc în neuronii lipsiți de caveole. Ambele tipuri de plute au o compoziție lipidică similară (îmbogățită cu colesterol și sfingolipide). Flotilina și caveolina au capacitatea de a recruta molecule de semnalizare în plutele lipidice, jucând astfel un rol important în semnalizarea mediată de neurotransmițători . S-a sugerat că aceste microdomenii sunt responsabile pentru organizarea spațială a moleculelor de semnalizare în așa fel încât să faciliteze interacțiunile favorabile cinetic necesare pentru transducția semnalului. Cu toate acestea, aceleași microdomenii separă moleculele semnalului, suprimând interacțiunile inutile și conducând la atenuarea semnalului [21] .
Termenul „semnalizare” se referă la orice proces prin care o celulă transformă un tip de semnal sau stimul în altul. Calea semnalului sau stimulului poate fi simplă, așa cum este cazul moleculelor receptorului. Transducția semnalului mai complexă implică implicarea complexelor ligand - receptor în multe procese intracelulare, cum ar fi fosforilarea prin tirozin kinaze sau serin-treonin kinaze [22] . Specificitatea și acuratețea transmisiei semnalului este esențială pentru un răspuns eficient al celulei la schimbările de mediu . Acest lucru se realizează parțial prin localizarea diferită a proteinelor implicate în căile de semnalizare. În membrana plasmatică, această compartimentare este realizată parțial de plute lipidice [23] .
Una dintre dovezile importante în favoarea existenței plutelor lipidice este activitatea lor ca platforme pe care receptorii individuali sunt concentrați după activare la legarea de un ligand [24] . Dacă activarea receptorului are loc în pluta lipidică în sine, atunci complexul de semnalizare este protejat de plută de enzimele externe, de exemplu, fosfatazele membranare . În general, plutele lipidice atrag proteinele într-un nou micromediu, astfel încât starea lor (de)fosforilată să poată fi alterată de kinaze și fosfataze locale și să dea naștere la reacții ulterioare ale căii de semnalizare [25] . S-a stabilit că plutele lipidice sunt implicate în multe căi de semnalizare, de exemplu, calea de semnalizare a imunoglobulinei E , receptorii de antigen al celulelor T și B , receptorul factorului de creștere epidermic (EGF), receptorul de insulină etc. Câteva exemple ale unor astfel de căi de semnalizare sunt prezentate mai jos.
Studiile căii de semnalizare a imunoglobulinei E (IgE) au demonstrat pentru prima dată în mod convingător implicarea plutelor lipidice în transducția semnalului [26] [27] [28] . Dovada participării plutelor lipidice la acest proces este solubilitatea redusă a receptorilor Fc-epsilon (FcεR) în detergentul Triton X-100 la trecerea de la o stare unică la o stare reticulat cu un alt receptor de același tip [26]. ] ; formarea de grupuri de gangliozide și proteine ancorate de GPI suficient de mari pentru a fi vizibile la microscop cu fluorescență [29] [30] ; terminarea căii atunci când colesterolul de suprafață este îndepărtat cu metil-β- ciclodextrină [31] , etc.
Secvența evenimentelor din această cale de semnalizare este următoarea. În primul rând, IgE se leagă de receptorii Fc-epsilon localizați în membranele plasmatice ale mastocitelor și bazofilelor prin segmentul lor Fc. Tetramerul FcεR constă dintr-un lanț α-, unul β- și două lanțuri y [28] . În primul rând, un tetramer FcεR se leagă de o moleculă de IgE. Lanțul α se leagă de IgE, iar celelalte trei lanțuri conțin motivele de activare pe bază de tirozină ale receptorului imun ( ITAM) [ motivul de activare a tirozinei . Antigenul oligomeric se leagă apoi la mai multe molecule de IgE deja legate la FcεR până în acel moment, cusând împreună doi sau mai mulți complexe de receptor. După o astfel de cuplare, non-receptor dublu acetilat Src - like tirozin kinaza Lyn este recrutat pentru a fosforila ITAM-ul celor doi receptori . În plus, tirozin kinaza din familia Syk se leagă de reziduurile de fosfotirozină ITAM (rezultatul muncii lui Lyn) și începe cascada de semnalizare [26] [27] . Syk, la rândul său, poate activa alte proteine, cum ar fi LAT. Proteinele LAT, prin legarea unele de altele, pot recruta alte proteine în plută și, în plus, pot amplifica (amplifica) semnalul [32] .
Receptorul antigen al celulelor T (TCR) este o moleculă găsită pe suprafața limfocitelor T (celulele T). Acesta include αβ- heterodimer , complex CD3-(γδε) și ξ-homodimer. Subunitățile α și β conțin situsuri de legare extracelulare pentru peptide care sunt prezentate pe proteinele complexului major de histocompatibilitate (MHC) de clasa I și II situate pe suprafața celulelor prezentatoare de antigen (APC). Subunitățile CD3 și ξ conțin motive citoplasmatice ITAM . În transducția semnalului, moleculele MHC se leagă de TCR, conectând doi sau mai mulți receptori împreună. Această legare la receptor, ca și în calea de semnalizare IgE, recrutează tirozin kinaze non-receptoare asemănătoare Src dublu acetilate pentru a fosforila motivele ITAM. TCR recrutează nu numai tirozin kinaza Lyn, ci și Fyn [23] [33] . După aceea, proteina ZAP-70 , care nu este implicată în calea de semnalizare a IgE, se leagă de ITAM-urile fosforilate, datorită cărora este activată ea însăși și activează LAT. Activarea LAT dă amplificarea semnalului. O altă diferență între calea de semnalizare TCR și calea de semnalizare IgE este că TCR-urile activează proteina Lck , ceea ce poate duce la o grupare mai puternică a plutei [34] [35] și, prin urmare, poate îmbunătăți semnalul. Un posibil mecanism pentru reglarea în jos a acestei căi ar putea fi legarea kinazei citosolice Csk de proteina asociată cu pluta CBP . După aceea, Csk poate suprima activitatea kinazelor din familia Src prin fosforilare [36] .
Receptorul antigen al celulei B (BCR) este un complex al unei molecule de imunoglobulină (mIg) legată de membrană și un heterodimer Igα-Igβ format din două polipeptide care sunt legate între ele prin legături disulfură [37] . Atât Igα cât și Igβ conțin motivul ITAM.
Semnalizarea BCR este similară cu semnalizarea IgE și TCR. Se crede pe scară largă că, pe lângă faptul că acționează prin BCR, plutele lipidice pot fi implicate în multe evenimente care apar pe suprafața unei celule B atunci când este activată. Funcțiile plutelor lipidice din celulele B includ participarea lor la calea de semnalizare BCR, modularea căilor de semnalizare de către co-receptori , căile de semnalizare CD40 , endocitoza antigenelor peptidice asociate BCR și încărcarea lor ulterioară în endozomii timpurii (peptide formate după distrugerea antigenului peptidic de către enzimele endozomale, va fi afișat ulterior pe suprafața celulei în combinație cu molecule MHC II și prezentat celulelor T) [37] .
Pentru virusuri , paraziți intracelulari obligați , pentru a intra într-o celulă, este necesară o interacțiune specifică între virus și receptorii celulari de pe membrana plasmatică. Se acumulează dovezi că virușii intră în celulă prin microdomenii membranare specifice, inclusiv plute lipidice.
Cele mai bine studiate exemple de penetrare celulară prin plutele lipidice ale virusurilor neîncapsulate sunt virusul maimuței SV40 ( familia Papovaviridae ) și echovirusul de tip I (EV1, familia Picornaviridae ) [38] [39] .
SV40 folosește doi receptori diferiți pentru a pătrunde în celulă: gangliozida GM1 , localizată în plutele lipidice și molecula MHC de tip I [38] . Legarea SV40 la molecula MHC de tip I determină gruparea și redistribuirea receptorilor. SV40 poate atrage mai multe caveole din citoplasmă și chiar poate provoca formarea de noi caveole la locul de intrare. Cascada de semnalizare declanșată de atașarea virusului la celulă duce la endocitoză virală mediată de caveola în 20 de minute. În unele tipuri de celule, virusul poate pătrunde în caveozomi (caveolele care înmuguresc din membrană) direct din veziculele neacoperite care înmuguresc din plutele lipidice [39] [40] .
EV1 folosește integrina α2β1 ca receptor celular . Mulți heterodimeri de integrină se pot lega la locurile vecine de pe capside virusului. Ca și în cazul SV40, atașarea virusului și legarea acestuia la celulă declanșează gruparea și mișcarea moleculelor de integrină de la plute lipidice la structuri asemănătoare caveolului. Când colesterolul este îndepărtat din plutele lipidice, infecția cu echovirus nu se dezvoltă [38] [39] .
Există, de asemenea, viruși care utilizează endocitoza mediată de plută noncaveolară, cum ar fi echovirusul 11 (EV11, familia Picornaviridae ), dar mecanismul detaliat al acestor procese nu a fost încă studiat [39] .
Virusurile gripale se leagă de un receptor celular, acidul sialic , care este atașat de un glicoconjugat care inițiază endocitoza. După ce virusul a fost transferat în endozomi tardivi, din cauza pH -ului scăzut, conformația hemaglutininei virale (HA) se modifică, după care învelișul lipidic al virusului fuzionează cu membrana endosomului, iar complexele ribonucleoproteine virale sunt eliberate în citoplasma. Această ieșire este declanșată de fluxul de protoni prin canalul de protoni viral M2 , care necesită legarea de colesterol pentru a funcționa. Virusul forestier Semliki (SFV, familia Togaviridae ) și virusul Sindbis (SIN, familia Togaviridae ) folosesc colesterolul și sfingolipidele pentru a pătrunde în celulă glicoproteina conținută în învelișul lor și intrarea ulterioară în citoplasmă [41] . Virusul T-limfotrop uman de tip I (HTLV-1, fam. Retroviridae ) intră în celulă prin intermediul transportorului de glucoză 1 ( GLUT1 ). Virusul Ebola și virusul Marburg folosesc receptorul de folat -α (FRα) ca receptor celular , care este o proteină ancorată la GPI. Virusul hepatitei B recunoaște receptorul complementului uman de tip 2 (CR2 sau CD21). Herpesvirusul uman de tip 6 (HHV-6) se leagă de receptorul CD46 de pe suprafața celulei. Toți acești receptori celulari sunt localizați în plute lipidice sau se deplasează acolo în timpul infecției .
Virusul imunodeficienței umane cu transmitere sexuală (HIV) trebuie să depășească bariera celulelor epiteliale care nu exprimă receptorul CD4 sau receptorii chemokine (acești receptori sunt adesea folosiți pentru a intra în celulă) pentru a intra în gazdă . Un receptor alternativ pentru glicoproteina învelișului HIV de pe celulele epiteliale este galactosilceramida glicosfingolipidă (GalCer), care este abundentă în plutele lipidice [42] [43] .
Unul dintre motivele numeroaselor controverse care au apărut în jurul plutelor lipidice este dificultatea de a le studia în celulele vii care nu sunt în echilibru termodinamic [21] . Rafturile lipidice sunt microdomenii mici cu dimensiunea de 10–200 nm [6] . Deoarece dimensiunea lor depășește limita de difracție a microscopului cu lumină , este extrem de dificil să se vizualizeze direct plutele lipidice. În prezent, membranele artificiale sunt în studiu, dar utilizarea lor are o mulțime de dezavantaje. În primul rând, conținutul de proteine din membranele artificiale este mult mai mic decât cel din membranele biologice. În al doilea rând, este dificil de modelat interacțiunile membrană- citoschelet care au loc în biomembrane. În al treilea rând, membranele artificiale sunt lipsite de asimetrie naturală și este imposibil să le studiem într-o stare de neechilibru [6] [44] .
O altă metodă utilizată intens pentru studierea plutelor lipidice este microscopia cu fluorescență. De exemplu, fluoroforele asociate cu subunitatea B a toxinei holerice sunt utilizate pe scară largă , care se leagă de componenta obligatorie a plutelor - gangliozida GM1. Se folosesc și coloranți lipofili pentru membrană , care fie sunt încorporați între plute și restul membranei, fie își modifică proprietățile fluorescente în funcție de faza membranei. Un exemplu de astfel de coloranți este laurdanul folosit frecvent . Rafturile pot fi, de asemenea, marcate prin exprimarea proteinelor marcate fluorescent, cum ar fi Lck- GFP .
Sechestrarea colesterolului cu filipină , nistatina și amfotericină B , îndepărtarea cu metil-B-ciclodextrină, suprimarea sintezei acestuia cu inhibitori de HGM-CoA reductază sunt exemple de astfel de metode . Ele fac posibilă observarea modificărilor semnalizării neurotransmițătorilor cu o scădere a nivelului de colesterol din membrană [21] .
Folosind imagini de înaltă rezoluție și modelare matematică, s-a demonstrat că proteinele lipidice sunt asamblate în nanoclustere de înaltă densitate, cu o rază de 5-20 nm. Folosind măsurarea transferului de energie de rezonanță de fluorescență ( eng. transfer de energie de rezonanță de fluorescență, FRET ) între aceleași probe (homo-FRET sau anizotropie de fluorescență ), Sharma și colegii au ajuns la concluzia că o fracțiune (20-40%) de GPI- proteinele ancorate sunt organizate în clustere de mare densitate cu o rază de 4–5 nm [45] . În prezent, pentru a depăși problema dimensiunii mici și a naturii dinamice a plutelor lipidice, se utilizează din ce în ce mai mult observarea mișcării particulelor și moleculelor individuale folosind camere CCD răcite și sensibile și microscopia cu reflexie internă totală (TIRF). Această tehnică face posibilă obținerea de informații despre capacitatea particulelor de a difuza în membrana studiată, precum și identificarea zonelor cu bariere limitate de difuzie și difuzie pe această membrană [46] .
Se folosesc și alte tehnici optice. De exemplu, spectroscopia de corelație și corelație încrucișată de fluorescență FCS/FCCS) poate fi utilizată pentru a obține informații despre mobilitatea unui fluorofor într-o membrană . Tehnica FRET ( Fluorescence Resonance Energy Transfer ) poate determina când fluoroforele sunt în imediata apropiere, iar tehnicile care folosesc pensete optice pot oferi informații despre vâscozitatea membranei [21] .
Microscopia de forță atomică , microscopia conducătoare de ioni de scanare ( Eng. Scanning Ion Conductance Microscopy (SICM) ), interferometria bipolarizare , rezonanța magnetică nucleară sunt, de asemenea, folosite pentru studiul plutelor lipidice ; cu toate acestea, microscopia cu fluorescență este încă tehnica dominantă pentru studiul plutelor lipidice. Se speră că în viitor microscopia cu super-rezoluție (ex . microscopia STED [47] ) și diverse forme de microscopie cu iluminare structurată vor ajuta la depășirea problemelor cauzate de limitarea difracției .
În plus, testul imunosorbent legat de enzime (ELISA), Western blot și sortarea celulelor activate prin fluorescență (FACS) [48] [49] [3] sunt folosite pentru a lucra cu plute .
Rolul plutelor în semnalizarea intracelulară, metabolismul și menținerea structurii celulare nu este încă pe deplin definit, în ciuda multor experimente folosind diverse metode, și chiar existența plutelor lipidice este pusă sub semnul întrebării [50] .
Următoarele argumente argumentează împotriva existenței plutelor lipidice:
Prima infirmare a ultimului punct este că faza Lo a plutei este mai densă datorită legăturilor de hidrogen intermoleculare dintre moleculele de sfingolipide și colesterol, iar aceste legături nu se formează în altă parte [51] .
Al doilea argument împotriva existenței plutelor lipidice se datorează eficacității distrugerii plutelor lipidice în cercetare. Eliminarea colesterolului din plute poate avea consecințe negative pentru fiabilitatea rezultatelor ulterioare asupra funcțiilor plutelor [52] . Majoritatea cercetătorilor au folosit metode dure pentru a elimina colesterolul din membrane, care au distrus nu numai plutele, ci și un alt fosfolipid membranar , fosfatidilinozitol-4,5-bifosfat (PI(4,5)P 2 ). Acest fosfolipid joacă un rol important în reglarea citoscheletului [53] , iar distrugerea lui poate duce la rezultate care se explică de obicei prin eliminarea colesterolului, inclusiv difuzia laterală a proteinelor în membrană [54] . Deoarece metodele cele mai frecvent utilizate distrug atât plutele, cât și PI(4,5)P2 , efectul eliminării colesterolului asupra unui anumit proces nu poate fi atribuit numai distrugerii plutei, deoarece multe procese care nu sunt plute pot fi afectate. În cele din urmă, deși acum se presupune că plutele sunt oarecum atașate de proteine, unii cercetători cred că proteinele pot fi recrutate în plută doar prin interacțiunea cu cozile acil lipidice care sunt ascunse în interiorul membranei, și nu altfel [55] .
| Structuri ale membranei celulare | |
|---|---|
| Lipide membranare | |
| Proteinele membranare |
|
| Alte |
|