ShRNA

ARN-urile mici în ac de păr , sau shRNA -urile ( ARN scurt în ac, ARN mic în ac, ARN scurt în ac) sunt molecule scurte de acid ribonucleic care formează ace de păr dense (structuri stem-bucle) în structura secundară .  ShRNA poate fi folosit pentru a suprima expresia genelor prin interferența ARN . ARN-urile scurte în ac de păr sunt introduse în celule folosind vectori în care secvențele lor de codificare sunt sub controlul unor promotori activi constitutiv (cum ar fi U6) sau inductibili . Astfel de vectori conțin de obicei secvențe de nucleotide care le permit să se integreze în genomul celulei și, prin urmare, asigură suprimarea ereditară a expresiei genei țintă [1] .

ARN-urile mici care formează ac de păr sunt transcrise de ARN polimeraza III . Formarea shRNA în celulele de mamifere declanșează uneori un răspuns cu interferon pentru a proteja celula, ca în cazul unui atac viral . Astfel de procese nu sunt observate în cazul miARN -urilor ( miARN ), care sunt transcrise de ARN polimeraza II [2] .

După ce transcrierea este finalizată, ARN-urile mici în ac de păr sunt tăiate de enzimele celulare pentru a forma ARN-uri mici de interferență ( siRNA ) .  ARN-urile interferente mici fac parte din complexul de oprire a genelor induse de ARN (RISC). Acest complex se leagă de ARNm care sunt complementare siARN -urilor și le taie.

ARN-urile mici în ac de păr sunt, de asemenea, utilizate în plante. În acest caz, promotorul CaMV35S activ constitutiv din promotorul 35S al virusului mozaic al conopidei este utilizat în mod tradițional  [ 3 ] .

Note

1. ↑ Paddison P., Caudy A., Bernstein E., Hannon G., Conklin D. ARN-urile scurte în ac de păr (shRNAs) induc tăcere specifică secvenței în celulele de mamifer  // Genes Dev  .  : jurnal. - 2002. - Vol. 16 , nr. 8 . - P. 948-958 . - doi : 10.1101/gad.981002 . — PMID 11959843 .
2. ↑ Cao W., Hunter R., Strnatka D., McQueen C., Erickson R. Construcțiile ADN concepute pentru a produce ac de păr scurt, ARN-uri de interferență la șoarecii transgenici prezintă uneori letalitate timpurie și un răspuns la interferon  //  J. Appl. Genet. : jurnal. - 2005. - Vol. 46 , nr. 2 . - P. 217-225 . — PMID 15876690 .
3. ↑ McIntyre G., Fanning G. Strategii de proiectare și clonare pentru construirea vectorilor de expresie shRNA  //  BMC Biotechnol. : jurnal. - 2006. - Vol. 6 . — P. 1 . - doi : 10.1186/1472-6750-6-1 . — PMID 16396676 .  (link indisponibil)